《PAX6在七氟醚抑制神經前體細胞增殖中的功能及機制研究》是依託復旦大學，由方芳擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：PAX6在七氟醚抑制神經前體細胞增殖中的功能及機制研究
- 依託單位：復旦大學
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：方芳
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
臨床研究顯示胎兒以及兒童期接受麻醉的患兒發生學習障礙的可能性增加。孕中期一直被認為是孕婦接受手術最安全的時期。但實際上從孕3個月起胎兒大腦就進入發育的第一個高峰期，生成大部分的神經元。對於七氟醚抑制神經前體細胞增殖的機制知之甚少。預試驗發現孕15.5天的小鼠接受七氟醚麻醉後胎鼠大腦中轉錄因子Pax6的表達受到抑制，伴隨著神經前體細胞增殖的減少以及細胞周期的改變。Wnt通路參與七氟醚對神經前體細胞增殖的抑制作用，而Pax6被證實是Wnt通路一個重要的下游基因。因此，我們提出“七氟醚通過Wnt通路影響轉錄因子Pax6及其下游基因cdk6和ccnd1的表達，造成神經前體細胞池的減少，最終引起胎鼠成年後行為學異常”的假說。為此，我們通過體內體外研究，尤其是體外建立Tet-on系統調節Pax6的表達，驗證七氟醚通過Wnt通路抑制Pax6及其下游細胞周期相關基因的表達從而影響神經前體細胞增殖。
結題摘要
有研究指出孕期吸入麻醉藥物的暴露可以影響胎兒大腦發育，進而影響其認知功能。胚胎期大腦神經發育異常可能和七氟醚的神經毒性有關，但具體機制目前不明。本實驗的目的在於探索七氟醚是否通過影響胚胎期大腦前額葉皮層神經前體細胞的細胞周期來影響其神經發生進而影響成年期的認知功能。將處於孕中期（孕15.5天）的孕鼠隨機分為2組，實驗組暴露於2.5%七氟醚+97.5%氧氣6小時，對照組暴露於100%氧氣6小時。一部分孕鼠繼續飼養待其產子，子代生長至產後28天時進行Morris水迷宮測試，檢測其認知功能變化。另一部分孕鼠脫頸處死取其胎鼠進行免疫螢光染色，檢測其神經元、神經前體細胞、增殖和細胞周期的變化。將得到的研究結果通過體外培養的神經幹細胞進一步驗證。Morris 水迷宮實驗結果提示，孕中期暴露於七氟醚可以導致胎兒在成年期出現學習記憶功能障礙。免疫螢光染色結果顯示，七氟醚可以導致胚胎大腦皮質神經前體細胞細胞周期S期延長、細胞周期推出減少，進而引起神經前體細胞增殖抑制、神經前體細胞數量減少、深層新生神經元數量減少。孕中期暴露於七氟醚可以導致子代認知功能障礙。七氟醚對胚胎期大腦的神經毒性主要表現在干擾胚胎期大腦皮質中神經前體細胞的細胞周期進展，引發神經前體細胞增殖和分化障礙，最終導致胚胎大腦皮質神經細胞的種類和數量發生異常。
