《NeuroD2調控人惡性神經膠質瘤細胞向神經元分化的作用研究》是依託中南大學，由周菂擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：NeuroD2調控人惡性神經膠質瘤細胞向神經元分化的作用研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：周菂
- 依託單位：中南大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
神經膠質瘤（Glioma）是一種來源於神經上皮的腫瘤，惡性的占所有膠質瘤的77.5%。惡性神經膠質瘤的致命性表現在它的指數增長和侵潤性上。如果能使腫瘤細胞分化成終末的神經元，維持在非增殖（或低增殖）狀態，降低侵潤性，這對於惡性神經膠質瘤的治療也許是一種可行的輔助策略。申請人在前期的研究中首次發現敲除/敲減p53能促進NeuroD2的表達，使人成纖維細胞向功能性神經元轉分化。本課題擬過表達NeuroD2來誘導人惡性神經膠質瘤細胞向終末神經元分化，並觀察敲除p53是否能促進這個分化過程；對分化過程是否經歷“乾/祖細胞”階段以及腫瘤細胞的自我更新能力和基因組穩定性的改變等進行分析；比較人胚胎幹細胞，人成纖維細胞和惡性膠質瘤細胞向神經元分化中的基因表達差異，探索惡性膠質瘤分化的特點，期望尋找到幾個關鍵的差異表達基因，從而進一步改善人惡性膠質瘤細胞向終末神經細胞分化的方法。
結題摘要
惡性神經膠質瘤（Glioblastoma，GBM）的致命性表現在它的指數增長和侵潤性上。我們在前期的研究中首次發現敲除/敲減p53能促進NeuroD2的表達，使人成纖維細胞向功能性神經元轉分化。本課題建立了敲除p53的U87和U251單克隆細胞系，隨機選取其中U87-B7和U251-D3經行誘導分化和其他生物學實驗。結果發現U251-D3能向MAP2陽性神經元誘導分化，而U87向MAP2陽性的神經元誘導存在一定阻礙。尤其是過表達NeuroD2能提高U251-D3的誘導分化效率，而U87-B7卻基本死亡，提示兩者在向神經元分化的能力上存在差異。分化過程可能經歷“乾/祖細胞”階段，U251-D3的神經前體標記Pax6、sox2和Vimentin上調。其次，我們比較了U87和U251在敲除前後細胞增殖、侵潤、遷移、凋亡、周期等生物學特性。結果顯示敲除p53的U87-B7和U251-D3增殖減慢，侵潤降低，遷移減少，凋亡增加，周期分布發生改變。將U87-B7和U251-D3移植入裸鼠腦內，未發現腫瘤形成，而移植U87和U251細胞的對照裸鼠腫瘤明顯，提前死亡。體內體外實驗結果均提示敲除p53可能可以降低GBM的指數生長特性和侵潤性。最後課題通過基因表達譜分析，發現Notch3，TGFα和HGF為敲除p53後表達明顯下調的基因，其中HGF和Notch可能由p53直接調控。本研究對p53在神經發育過程中的機制研究做了新的探索，可能在神經膠質瘤基因治療領域有一定套用前景。
