《Netrin-1調控缺氧誘導的EMT肝癌細胞自我種植的實驗研究》是依託華中科技大學，由晏維擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：Netrin-1調控缺氧誘導的EMT肝癌細胞自我種植的實驗研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：晏維
- 依託單位：華中科技大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
肝癌易發生早期轉移，術後5年復發率超過50%，其機制迫切需要深入探討。最近研究顯示，腫瘤轉移不是一個單向過程，侵入循環系統的腫瘤細胞不僅向遠處轉移，還可以通過自我種植重新回到原發灶。自我種植對腫瘤復發轉移提出了全新的認識，但其機制不清楚。我們前期研究表明缺氧環境中Netrin-1促進肝癌細胞發生EMT，EMT肝癌細胞侵襲力顯著增強，具有抗失巢凋亡能力；侵襲力越強越容易發生自我種植，這些提示EMT肝癌細胞在自我種植中可能發揮重要作用，但其具體機制亟待研究。本項目在此基礎上，研究Netrin-1調控EMT肝癌細胞的自我種植，探討Netrin-1在膜上脂筏中的信號傳導及下游分子機制；運用裸鼠模型，活體成像技術檢測抑制Netrin-1和破壞脂筏對EMT肝癌細胞自我種植的影響。深入研究在Netrin-1促進肝癌自我種植的分子機制，闡明自我種植在肝癌早期轉移復發中的作用，以期獲得潛在干預靶點。
結題摘要
肝癌易發生早期轉移是其術後復發及預後差的主要原因。在腫瘤的轉移過程中，癌細胞主要通過上皮間質轉化（EMT）獲得遷移、侵襲能力。最近研究顯示，腫瘤轉移不是一個單向的過程，侵入循環系統的腫瘤細胞不僅向遠處轉移，還可以通過自我種植重新回到原發灶。自我種植對腫瘤復發轉移提出了全新的認識，但其機制不清楚。Netrin-1是層黏連蛋白相關的分泌蛋白，參與調控神經軸突生長和腫瘤細胞的侵襲轉移。本項目旨在研究netrin-1及其下游信號對肝癌細胞EMT自我種植的調節作用。通過慢病毒篩選得到表達螢光素酶的肝癌細胞；建立螢光素酶陽性肝癌細胞物理缺氧模型，通過細胞形態、標誌蛋白及功能改變鑑定EMT細胞；ELISA檢測發現缺氧培養EMT肝癌細胞Netrin-1及其下游信號通路表達增強，siRNA干擾Netrin-1的表達及抑制脂筏可抑制EMT肝細胞侵襲力，轉染Netrin-1質粒增強EMT肝癌細胞侵襲能力；通過小鼠肺轉移、肝轉移模型及活體成像技術，我們發現檢測抑制Netrin-1和破壞脂筏可抑制EMT肝癌細胞自我種植。通過不同水平研究發現Netrin-1對肝癌細胞自我種植的重要調節作用，進一步深入研究Netrin-1調控肝癌細胞自我種植的分子機制，可能為抑制肝癌早期轉移提供干預靶點
