《NMDA受體對FSGS足細胞細胞骨架改變的作用及機制研究》是依託浙江大學，由沈佳擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：NMDA受體對FSGS足細胞細胞骨架改變的作用及機制研究
- 依託單位：浙江大學
- 項目負責人：沈佳
- 項目類別：青年科學基金項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
局灶節段性腎小球硬化症（FSGS）臨床以腎病綜合徵為主要表現，其發生與足細胞的細胞骨架結構和功能改變密切相關。小分子GTP酶家族是細胞骨架纖維動力學調控的重要轉導分子，其受Ca2+調控的RhoA/Rho激酶系統啟動影響；NMDAR是谷氨酸的離子型膜受體，為功能性Ca2+通道，足細胞源NMDAR激活可導致細胞骨架的明顯改變。本課題將先利用大鼠和足細胞FSGS模型，套用細胞膜片鉗、GST-pull down、共聚焦成像等技術，觀察FSGS病程中足細胞NMDAR表達和活性變化，及下游Ca2+依賴的骨架功能相關信號途徑、結構特異性蛋白表達及分布的影響；然後，建立慢病毒質粒表達體系干擾NMDAR表達與活化，觀察對足細胞足突完整性與腎小球濾過的影響。本研究能明確NNMDR對小鼠FSGS模型細胞骨架結構改變的防治效果；解明其在FSGS模型中可能信號轉導分子機制；為FSGS蛋白尿防治提供新的可能治療靶點。
結題摘要
糖尿病腎病（DN）是導致終末期腎病和糖尿病患者死亡的首要原因，其導致的蛋白尿的發生於足細胞結構和功能的改變密切相關。本課題在體小鼠糖尿病模型和離體足細胞高糖模型中觀察NMDA受體亞基NR1的表達，顯示在高糖下腎源性NR1表達增高，足細胞中表達亦增高。 在高糖下，NMDA受體激活導致了足細胞內鈣離子升高，而Ca2+的增高則激活胞內cPKC磷酸化，進而促進內質網NR1成熟釋放。在NMDA受體激活後，下游胞內鈣信號、細胞骨架相關信號途徑分子RhoA、Rac1和Cdc42的GTP化增高，足突結構相關蛋白Synaptopodin表達下降。構建NR1 shRNA慢病毒干擾體系，於離體和在體水平轉染，足細胞足突形態、細胞骨架相關蛋白成分及骨架纖維動力學改變均有所改善，同時糖尿病所導致的尿蛋白量亦有所下降。
