NFIL3導致的高IgE綜合症IgE類別轉換重組增強的機制研究

《NFIL3導致的高IgE綜合症IgE類別轉換重組增強的機制研究》是依託上海交通大學，由陳同辛擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：NFIL3導致的高IgE綜合症IgE類別轉換重組增強的機制研究
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：陳同辛
• 依託單位：上海交通大學

項目摘要

STAT3突變的高IgE綜合症(HIES)IgE病理性增高，但其增高機制和臨床意義尚不清楚。HIES IgE增高與信號刺激和半衰期無關，我們發現其IgE類別轉換重組障礙。敲除STAT3，依賴STAT3的IgE類別轉換重組缺失。NFIL3缺失IgE類別轉換重組障礙，而IL-4可通過STAT6促進NFIL3高表達，因此我們推測NFIL3是導致HIES IgE增高的另外一條通路。我們以人HIES為研究模型，通過EBV轉染建立HIES永生B細胞，利用細胞和分子生物學方法、整合生物信息學分析，擬從轉錄調控和表觀修飾層面探討NFIL3對HIES IgE類別轉換重組影響，研究包括NFIL3表達和核漿分布，其對CSR增強作用、誘導IgE漿細胞分化、作用靶基因和信號傳導通路等。此為闡明HIES發病機制和探索靶向干預提供理論依據；也為篩選有效抗IgE藥物治療過敏、寄生蟲感染和腫瘤等IgE相關疾病開闢新途徑。

結題摘要

高IgE綜合徵（Hyper IgE syndrome, HIES）是一種極為罕見的原發性免疫缺陷病，臨床主要表現為濕疹、反覆皮膚和肺部感染，並伴有血清IgE水平顯著升高。STAT3基因突變導致的常染色顯性遺傳（AD）HIES占HIES患者的大多數。目前，AD-HIES患者血清IgE水平極度增高的分子機制仍然不甚明了。在本項研究中，我們共收集了17例AD-HIES患者，對其臨床表現，實驗室檢查結果進行了詳盡的分析。我們在17例STAT3突變的患者中發現了11種不同的突變，其中包括1種新發突變。這是目前為止中國最大規模樣本的HIES報導，極大地促進了中國臨床醫師對於HIES患者的認知能力。我們對部分HIES患者的淋巴細胞表型進行分析。結果表明， STAT3 突變並未影響到B 淋巴細胞早期分化發育，也不影響漿細胞的發育；但可影響各類記憶性B細胞以及B1細胞的分化，導致其比例降低；然而IgE+B細胞以及IgE+記憶性B細胞升高均升高，這可能是導致HIES患者血清IgE升高的原因之一。HIES患兒類別轉換型記憶性B細胞降低，說明STAT3突變可導致抗體的類別轉換障礙。當利用IL-4與CD40L協同刺激B細胞，NFIL3基因的表達量在STAT3突變的HIES患者中的表達量明顯高於正常對照。IL-4與CD40L協同刺激EBV轉化的永生化B細胞株，IgE的水平在HIES患者中高於正常人，而IgE的水平在NFIL3沉默型的正常人以及HIES患者細胞株中均降低；同時NFIL3 KD後可降低CSR關鍵基因的表達水平，說明NFIL3參與了IL4誘導的HIES患兒血清IgE的生成過程。染色質免疫共沉澱聯合螢光報告基因實驗證明，NFIL3可結合Iε啟動子，並調控Iε的轉錄。最後，我們還發現，STAT3表達抑制後，TLR9信號通路介導的B細胞活化障礙，導致B細胞的增殖、凋亡及表面共刺激分子表達障礙。 綜上所述，本研究報導了17例HIES患者，是中國最大規模樣本的HIES報導。我們發現，STAT3突變可導致HIES患者各類記憶性B細胞分化障礙，IL4介導的NFIL3表達水平的升高可能是導致HIES患者血清IgE水平升高的原因；NFIL3可直接調控Iε基因的表達，進一步促進抗體的類別轉換。抑制STAT3表達導致TLR9信號通路介導的B細胞活化障礙。