NFI-C調控根尖牙乳頭幹細胞定向分化分子機制的研究

《NFI-C調控根尖牙乳頭幹細胞定向分化分子機制的研究》是依託中國人民解放軍第四軍醫大學，由何文喜擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：NFI-C調控根尖牙乳頭幹細胞定向分化分子機制的研究
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：何文喜
• 依託單位：中國人民解放軍第四軍醫大學

中文摘要

根尖牙乳頭幹細胞(SCAP)是牙根發育時成牙本質細胞的來源，其分化異常可導致牙根發育異常。NFI-C是特異性調控牙根發育的信號分子，NFI-C基因敲除僅見牙根成牙本質細胞分化異常。牙根發育時NFIC如何調控SCAP分化為成牙本質細胞，其細胞內分子機制如何，目前尚不清楚。本項目擬通過基因轉染和RNA干擾技術構建NFI-C基因過表達和NFI-C基因沉默的SCAP細胞系，體內和體外實驗研究NFI-C調控SCAP向成牙本質細胞分化及牙本質形成中的作用，進一步通過免疫共沉澱法確定與NFI-C相互作用的轉錄因子，最後通過染色質共沉澱和EMSA等方法確定NFI-C調控的下游靶基因的結合位點，旨在闡明NFI-C調控SCAP定向分化為成牙本質細胞的分子機制，探討NFI-C在牙根發育中的分子機制，對闡明牙根發育的分子機制和牙根發育異常致病機理有重要意義，為將來臨床套用SCAP提供新的思路和途徑。

結題摘要

根尖牙乳頭幹細胞（SCAPs）是牙根部成牙本質細胞的來源，最終形成牙根部牙本質。核轉錄因子NFIC（nuclear factor I-C）是特異性調控牙根發育的信號分子，但是NFIC在調控SCAPs分化中的作用及其機制如何，目前尚不清楚。轉化生長因子β1（TGF-β1）參與成牙本質細胞分化、牙本質和牙根的形成，但TGF-β1在調控SCAPs分化中的作用，及與NFIC的相互作用機制尚不清楚。本項目目的是研究NFIC對SCAPs增殖、分化的影響。及TGF-β1對SCAPs生物學特性及分化的影響，探討NFIC與TGF-β1信號通路在SCAPs分化中的相互作用機制。本項目成功分離培養人根尖牙乳頭幹細胞，構建NFIC過表達載體，通過體外分子生物學手段證實NFIC明顯促進SCAPs的增殖和成牙分化能力，將過表達NFIC的SCAPs細胞複合膠原/煅燒牛骨植入裸鼠皮下，可促進形成類成牙本質細胞和牙本質樣結構。TGF-β1抑制SCAPs增殖和體外分化能力，TGF-β1抑制NFIC蛋白的表達，過表達NFIC減弱TGF-β1對SCAPs礦化能力的抑制作用，而沉默NFIC則增強了TGF-β1對SCAPs成牙/骨的分化能力。研究初步闡明了NFIC和TGF-β1在調控SCAPs增殖和分化中的作用，及NFIC參與了TGF-β1對SCAPs分化特性的調控，為進一步研究SCAPs在牙髓牙本質再生和生物學牙根的組織工程研究提供了新的研究思路。