《MicroRNAs對缺氧環境中RA關節滑膜成纖維細胞的調控及其機制》是依託同濟大學，由虞珊珊擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：MicroRNAs對缺氧環境中RA關節滑膜成纖維細胞的調控及其機制
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：虞珊珊
- 依託單位：同濟大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
類風濕性關節炎(RA)患者關節腔記憶體在缺氧情況，推動著滑膜炎症持續進展。細胞在缺氧條件下產生大量特徵性的microRNAs（miRNAs）,也被稱為hypoxamiR，是低氧環境中參與適應性應答的重要成員。而hypoxamiR是否參與了缺氧環境下滑膜成纖維樣細胞（FLS）的一系列生物學行為的調控仍有待研究。本項目前期研究證實缺氧可促進FLS增殖並分泌大量炎性細胞因子。在後續研究中，本課題組將套用高通量技術篩選出一組缺氧誘導FLS的差異表達miRNAs。通過過表達和抑制實驗研究候選miRNAs對FLS缺氧應答的影響，包括其增殖凋亡水平，侵襲性，表達HIF-1α的水平及VEGF和炎性細胞因子的分泌，並進一步研究miRNAs調控FLS的作用機制，包括其誘導機制及其下游靶蛋白。目的是闡明miRNAs對缺氧環境中RA關節滑膜成纖維細胞的調控及其機制，以期為類風濕性關節炎的治療找到新的分子靶標。
結題摘要
類風濕關節炎（rheumatoid arthritis, RA）患者關節滑膜襯裡層的成纖維樣滑膜細胞 (fibroblast like synoviocytes ,FLS) 異常增殖，是RA關節滑膜增生和破壞的關鍵環節。由於RA-FLS類腫瘤樣的增殖和大量炎症細胞的浸潤，導致局部毛細血管氧彌散距離增加和耗氧量增加，致RA關節腔內缺氧。研究發現腫瘤細胞等在缺氧條件下產生大量特徵性的microRNAs（miRNAs）,也被稱為hypoxiamiR，是低氧環境中參與適應性應答的重要成員。本課題組分離培養原代RA-FLS細胞，並將RA-FLS分別置於缺氧環境（3%O2）和常氧環境（21%O2）中培養。套用高通量技術篩選出一組缺氧環境中RA-FLS的差異表達miRNAs。 其中miR-191在三株缺氧培養的RA-FLS中均顯著上調錶達。進一步研究發現過表達miR-191可以縮短RA-FLS細胞周期，促進RA-FLS增殖；而抑制miR-191可延長RA-FLS細胞周期，抑制RA-FLS增殖。拮抗miR-191後，RA-FLS細胞抗凋亡蛋白BCL-2及細胞周期蛋白CyclinD1均下調錶達，並且凋亡蛋白caspase-3的活化增多。靶基因篩選中發現，3’ UTR螢光報告結果顯示，miR-191可與C/EBPβ 3’UTR區域結合，證實C/EBPβ為miR-191的靶基因；過表達miR-191顯著下調CCAAT/增強子結合蛋白β（C/EBPβ）的mRNA和蛋白水平的表達。敲除C/EBPβ可模擬miR-191的作用縮短RA-FLS周期而促進細胞增殖。目的是闡明miR-191誘導的RA-FLS增生的分子機制，以期為類風濕關節炎的治療尋找新的分子靶標。
