《MicroRNA靶向調節sPLA2-ⅡA表達在動脈粥樣硬化發病機制中的作用》是依託廈門大學，由李衛華擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：MicroRNA靶向調節sPLA2-ⅡA表達在動脈粥樣硬化發病機制中的作用
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：李衛華
- 依託單位：廈門大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
我們前期研究發現急性冠脈綜合徵（ACS）患者血漿ⅡA分泌型磷脂酶（sPLA2-ⅡA）水平明顯增高，可作為動脈粥樣硬化（AS）斑塊穩定性的預測因子預測ACS病變性質及預後；近期研究發現ACS患者血漿miR-30c-1-3p水平與sPLA2-ⅡA水平呈顯著負相關，運用miRNA靶基因預測軟體發現miR-30c-1-3p可靶向作用於sPLA2-ⅡA，且人源miR-30c-1-3p序列與小鼠種系完全一致。目前尚缺乏miR-30c-1-3p是否可靶向調節sPLA2-ⅡA表達的相關性研究。本課題利用攜帶miR-30c-1-3p的真核表達載體，在血管平滑肌細胞（VSMC）上探討miR-30c-1-3p對sPLA2-ⅡA表達的調節、對VSMC轉化為泡沫細胞的調控作用；並用ApoE-/-小鼠觀察miR-30c-1-3p對在體動物AS形成的影響。為臨床防治AS及相關性疾病提供新的干預靶點和科學實驗依據。
結題摘要
動脈粥樣硬化（Atherosclerosis，AS）是眾多心腦血管疾病共同的病理基礎。sPLA2-IIA在動脈粥樣硬化病變處含量明顯增多、活性顯著增強，同時伴隨中性粒細胞的增多,參與AS發生髮展的各個階段。本課題前期研究發現ACS患者血漿sPLA2-IIA水平顯著增高，且miR-30c-1-3p水平與sPLA2-IIA水平呈顯著負相關，但目前關於miR-30c-1-3p是否可靶向調節sPLA2-IIA表達的相關性研究還未有報導。 本項目首先構建了miR-30c-1-3p表達載體，並選取原代大鼠主動脈血管平滑肌細胞進行研究，以慢病毒轉染miR-30c-1-3p到大鼠主動脈血管平滑肌細胞。體外實驗結果表明，miR-30c-1-3p可以明顯抑制IL-1β，TNF-α以及ox-LDL誘導的sPLA2-IIA表達水平和平滑肌細胞的增殖，同時，miR-30c-1-3p可明顯抑制ox-LDL誘導的細胞內膽固醇的水平。 本課題組使用ApoE基因敲除小鼠建立動脈粥樣硬化模型，蘇丹IV染主動脈組織，觀察到miR-30c-1-3p組主動脈脂質斑塊面積明顯小於對照組。進一步對主動脈竇組織進行冰凍切片，油紅染色結果發現，miR-30c-1-3p明顯抑制主動脈竇脂質的蓄積。HE染色主動脈根病灶處的壞死區，結果顯示：miR-30c-1-3p可明顯抑制小鼠動脈粥樣硬化主動脈根病灶處的壞死核心面積。收集小鼠血清，結果發現，miR-30c-1-3p組血脂（甘油三酯，低密度脂蛋白和高密度脂蛋白）的水平明顯低於對照組，同時，western-blotting結果顯示，注射miR-30c-1-3p agomir組的小鼠動脈組織中，sPLA2-IIA的表達明顯下調。 綜上所述，我們的體外和在體實驗結果提示：miR-30c-1-3p可能通過靶向下調sPLA2-IIA的表達，抑制動脈粥樣硬化的發展。本研究為臨床防治AS及相關性疾病提供新的干預靶點和科學實驗依據。
