《MicroRNA介導轉錄調控CDK抑制劑抗AML效應及機制研究》是依託浙江大學，由劉輝擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：MicroRNA介導轉錄調控CDK抑制劑抗AML效應及機制研究
- 依託單位：浙江大學
- 項目負責人：劉輝
- 項目類別：青年科學基金項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
轉錄調控細胞周期蛋白依賴激酶（CDK）的活性被抑制後能夠影響RNA聚合酶II磷酸化，進而抑制RNA轉錄並下調抗凋亡蛋白Mcl-1等，誘導細胞凋亡。轉錄調控CDK抑制劑對慢性淋巴細胞白血病有顯著殺傷作用，但對急性髓系白血病（AML）的作用及分子機制尚不清楚。我們前期研究發現，轉錄調控CDK抑制劑SNS-032能顯著誘導AML細胞凋亡，下調多種與AML關係密切的microRNA（miR）。由於RNA聚合酶II是調節miR基因轉錄的主要因子，故我們推測miR可能介導SNS-032抗AML效應。本項目擬套用AML患者原代細胞和細胞株，通過體外試驗和荷瘤小鼠模型研究，闡明相關miR的靶基因及下游通路，探討其與SNS-032抗AML效應之間的相關性。本研究的實施，一方面將為轉錄調控CDK抑制劑SNS-032治療AML提供新的理論依據，另一方面也將拓展我們對miR在AML中所發揮作用的認識。
結題摘要
小分子抑制劑靶向抗腫瘤是目前國際上研究的熱點，而靶向轉錄調控細胞周期蛋白依賴激酶（CDK）以治療急性髓系白血病（AML）也是近年來血液腫瘤領域內研究的一個方面，但具體作用機制仍不甚明確。轉錄調控CDK抑制劑SNS-032能夠影響RNA聚合酶Ⅱ磷酸化，並能進一步顯著誘導急性髓系白血病（AML）細胞凋亡。在本項目中，我們利用SNS-032，作用於AML細胞株、原代白血病細胞，進一步研究發現，SNS-032能誘導AML細胞發生G1期阻滯，並在Ser2448和Ser2481強烈抑制哺乳動物雷帕黴素靶蛋白（mTOR）磷酸化，抑制mTOR複合體1（mTORC1）和mTORC複合體2（mTORC2）合成，並進一步抑制mTORC1下游蛋白真核翻譯起始因子-4E結合蛋白1（4E-BP1）和核糖體S6蛋白激酶（p70S6K）的磷酸化，及mTORC2下游蛋白磷酸化n-Myc下游調節基因1（NDRG1）的表達。我們的研究揭示，Akt抑制劑perifosine能通過抑制Akt磷酸化協同SNS-032發揮抗AML作用。此外，我們還證實，SNS-032對正常單個核細胞無明顯毒性作用，具有較好的靶向性。我們在前期工作通過最新的第六代微小RNA（MicroRNA, miR）表達譜晶片技術進行分析，發現一系列HL-60細胞中一系列miR表達水平顯著改變，而HEL細胞中無類似miR變化，但通過定量PCR檢測HL-60細胞株中miR-17-92基因簇、miR-26b及miR-107的表達水平，均未見濃度依賴或時間依賴的抑制效應。我們進一步收集AML患者骨髓，通過對患者原代AML細胞的研究，我們證實SNS-032的抗白血病效應不受FAB分型、是否復發難治、細胞遺傳學改變、FMS樣的酪氨酸激酶3內部串聯重複（FLT3-ITD）突變和核仁磷蛋白1（NPM1）突變的影響。綜上所述，我們研究揭示了SNS-032抗AML效應的相關機制，為靶向轉錄調控CDK抗白血病的臨床研究奠定基礎。
