MiR-221/222及其靶基因ADAMs調控血管生成分子機制研究

《MiR-221/222及其靶基因ADAMs調控血管生成分子機制研究》是依託華中科技大學，由殷鐵軍擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：MiR-221/222及其靶基因ADAMs調控血管生成分子機制研究
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：殷鐵軍
• 依託單位：華中科技大學

中文摘要

腫瘤發生、發展是多因素、多步驟的複雜過程，血管生成是腫瘤生長、侵襲及轉移的關鍵環節。項目組前期研究顯示，人臍靜脈內皮細胞中miR-221/222經恩度干預後表達上調，內皮細胞遷移能力下降，初步證明miR-221/222抑制血管生成作用。進而利用生物信息學軟體預測miR-221/222的靶基因，去整合素一金屬蛋白酶( A Disintegrin And Metalloprotease domain，ADAMs)家族中ADAM10、ADAM9等為miR-221/miR-222靶基因。綜上，提出如下假說：1.ADAM10為miR-221/222的靶基因；2.miR-221/222通過下調靶分子ADAM10發揮抗腫瘤血管生成作用；3.存在經由恩度-miRNAs-ADAMs途徑調控腫瘤血管生成的信號通路。項目完成不但深刻揭示miRNAs-ADAMs調控腫瘤血管生成的作用機制，而且有益於指導臨床實踐。

結題摘要

腫瘤治療的關鍵是腫瘤是否侵襲性轉移，而腫瘤血管的生成則是腫瘤由休眠狀態過度到惡性生長和遠處轉移的關鍵狀態。近年研究顯示microRNA參與生物生長、發育、生理和病理等許多複雜的生命過程。並且miRNA表達水平的變化參與了腫瘤血管生成等與血管內皮細胞相關的疾病的發生和發展的關鍵環節。ADAM17是去整合素-金屬蛋白酶 (a disintegrin and metalloproteinase，ADAM) 家族的一員，ADAM17可以脫落血管內皮生長因子（VEGF）而與血管內皮生長因子受體(VEGFR)結合對血管生成起調節作用。本項目原計畫驗證ADAM17是否為miR-221/222的靶基因並了解miR-221/222、ADAM17對血管內皮細胞增殖、遷移能力的影響。在課題實施中由實驗證實hsa-miR-221、hsa-miR222與ADAM17基因無明顯相互作用。因此重新篩選出於ADAM17關係密切的miR145與miR512-3p兩個microRNA，進而研究內容調整為miR145與miR512-3p通過調控ADAM17的表達而調節血管內皮細胞的增殖與遷移的功能。在本項目中，通過分別轉染miRNA模擬物和陰性對照模擬物進入HUVECs（人臍靜脈血管內皮細胞），進而比較兩種模擬物對HUVECs的作用效果。發現轉染後的HUVECs增殖和遷移能力明顯受到抑制，這說明miR145與miR512-3p具有抑制HUVECs的增殖和遷移的能力。通過生物學軟體進行預測，發現ADAM17是miR145及miR512-3p的靶基因。實驗結果也表明，轉染miR145及miR512-3p可以抑制ADAM17的mRNA的表達並降低ADAM17蛋白表達水平。這說明miR145及miR512-3p可能是通過調控其靶基因ADAM17的表達而發揮抑制HUVECs的增殖和遷移的功能。如果把miR145及miR512-3p用於如肺癌等腫瘤治療，那么既可以抑制腫瘤血管的生成，同時又能抑制腫瘤細胞的增殖、侵襲和遷移，制腫瘤血管生成的作用將為腫瘤臨床治療提供一個新的切入點。