《MiR-200a/ZEB通路參與肝癌幹細胞的產生和轉移的機制研究》是依託中國人民解放軍第四軍醫大學，由李海民擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：MiR-200a/ZEB通路參與肝癌幹細胞的產生和轉移的機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：李海民
- 依託單位：中國人民解放軍第四軍醫大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
肝癌幹細胞是肝癌發生和轉移的種子，調控這些幹細胞產生的分子機制尚不清楚,近年發現的EMT過程是其中的一個突破口。EMT即上皮類型向間充質類型轉化過程，能賦予腫瘤細胞以幹細胞特性。肝癌幹細胞是否來自於發生了EMT過程的肝癌細胞，尚不明確。我們利用建立的肝癌幹細胞亞群（SP細胞）分離方法，獲取了SP細胞的失調microRNA表達譜。在眾多microRNAs中，我們發現miR-200a下調幅度最大。有趣的是，miR-200a的靶基因ZEB等已被證實對EMT過程發揮決定性作用。那么，miR-200a在SP細胞中顯著下調是否促進肝癌細胞發生EMT過程進而成為肝癌幹細胞，仍待探究。我們擬在SP細胞中通過調節miR-200a和下游分子ZEB的表達水平，觀察其對SP細胞的幹細胞特性影響，以及對EMT過程的貢獻，進一步明確miR-200a-ZEB通路調控作用的分子機制，最終為肝癌的防治提供新思路。
結題摘要
近年來，微小RNA被證明與腫瘤的遠處轉移相關。儘管microRNA-200a （miR-200a）在人類很多的腫瘤中表達為下調狀態，但miR-200a在腫瘤邊緣群細胞（ side population ），即一群具有腫瘤幹細胞特性的亞群細胞中的表達未被檢測過。在本研究中，本課題組通過收集我科室手術切除的101對肝癌組織和其相對應的癌旁組織，檢測miR-200a在該組織中的表達，並與該患者臨床病理進行統計分析。同時，通過流式細胞分選儀，利用紫外雷射識別，分選出肝癌細胞系中邊緣群細胞，並在體外以及體內進行相關實驗，證實是否與侵襲轉移相關。miR-200a的下游靶基因甚多，實驗篩選出包括鋅指蛋白ZEB在內的可能靶基因進行驗證，證明ZEB相關功能。實驗結果表明，miR-200a在肝癌組織中以及肝癌邊緣群細胞中為低表達，並與遠處轉移相關。miR-200a在體外以及體內可以抑制肝癌邊緣群細胞的侵襲轉移。通過上調SP細胞中miR-200a的表達，發現與轉移相關的標誌物發生變化，並且抑制了ZEB2的表達。該實驗通過將miR-200a、SP細胞以及ZEB2聯繫起來，探索其在肝癌中的機制。因此，本實驗證實miR-200a通過ZEB2繼而影響SP細胞的侵襲轉移。
