《MTA2基因調控胃癌侵襲及轉移的分子機制研究》是依託上海交通大學，由張俊擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：MTA2基因調控胃癌侵襲及轉移的分子機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：張俊
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
腫瘤侵襲及轉移是影響胃癌患者預後的重要因素。本課題組前期發現MTA2基因與胃癌浸潤深度、淋巴結轉移等惡性表型密切相關，敲低MTA2表達能明顯抑制胃癌細胞SGC-7901及AGS遷移及侵襲；並伴CD24等基因的表達下調。本研究擬闡明MTA2基因通過CD24影響胃癌細胞侵襲及轉移的具體分子機制，並明確MTA2在胃癌表達的轉錄調控機制；為探索以MTA2相關通路為靶點的分子靶向治療奠定基礎。具體內容包括：（1）調節胃癌細胞MTA2表達狀態，觀察轉移相關生物學行為變化，結合臨床標本檢測，明確其在胃癌侵襲轉移中的作用；（2）明確CD24在MTA2調控的胃癌細胞侵襲及轉移中的作用機制，並探索MTA2是否參與CD24轉錄調控；（3）通過螢光素酶報告基因、染色質免疫共沉澱等技術，結合臨床標本檢測，明確MTA2基因在胃癌表達的轉錄調控機制。
結題摘要
本課題從組織、細胞、分子三個層次，系統地研究了轉移相關基因2（metastasis associated 1 family member 2，MTA2）在胃癌中的生物學功能，及其上下游調控機制。結果顯示，下調MTA2基因表達（shRNA轉染）可明顯抑制胃癌細胞SGC-7901及AGS軟瓊脂克隆形成、劃痕癒合、遷移及侵襲能力，上調MTA2基因表達（MTA2表達質粒）則增強胃癌細胞BGC-823及MKN28克隆形成能力。體內試驗中，下調MTA2明顯抑制SGC-7901胃癌細胞皮下成瘤及肺轉移能力，反之，上調MTA2顯著增強BGC-823胃癌細胞皮下移植瘤及肺轉移灶生長能力。 通過表達基因晶片分析MTA2上調及下調後BGC-823及SGC-7901胃癌細胞內差異表達基因，顯示12個基因為兩組數據共有且具有顯著倍率改變。IL-11表達倍率在SGC-7901/shMTA2細胞中為0.2631（P=0.0054），在BGC-823/MTA2細胞中為7.3145（P=7.74e-06）。外源性給予重組人IL-11可恢復SGC-7901/shMTA2細胞體外克隆形成能力（克隆形成數：SGC-7901/shMTA2/rhIL-11比SGC-7901/shMTA2/PBS：25.6 ± 1.5比20.0 ± 2.3，P=0.015）。顯示IL-11是MTA2調控胃癌細胞生長的下游效應分子。 進一步分析MTA2在胃癌中表達的轉錄調控機制。發現MTA2啟動子關鍵調控區域位於其轉錄起始密碼子上游-482bp至-323bp處。轉錄因子Sp1與MTA2在胃癌中表達呈正相關，上調Sp1表達可增強MTA2啟動子轉錄活性，但下調Sp1未見MTA2表達抑制。在MTA2啟動子關鍵轉錄調控區域發現轉錄因子TFAp2A結合位點。下調SGC-7901及MKN45胃癌細胞中轉錄因子TFAp2A（shRNA轉染）可顯著抑制MTA2表達及其啟動子轉錄活性，並明顯抑制SGC-7901及MKN45胃癌細胞克隆形成能力及IL-11 mRNA表達。組蛋白去乙醯化酶抑制劑SAHA可下調TFAp2A、MTA2及IL-11表達，並下調MTA2啟動子轉錄活性。以上結果顯示，胃癌中存在TFAp2A/MTA2/IL-11通路，參與調控胃癌細胞生長。MTA2表達還與細胞組蛋白乙醯化水平相關。
