《MIA基因TRS調控一新的自殺基因系統靶向治療黑素瘤的研究》是依託華中科技大學，由陳思遠擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：MIA基因TRS調控一新的自殺基因系統靶向治療黑素瘤的研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：陳思遠
- 依託單位：華中科技大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
本研究以黑素瘤特異性高表達的Melanoma-inhibiting activity (MIA)蛋白基因轉錄調控序列（TRS）為調控元件，設計一新的受其調控的自殺基因前體藥物系統- - 蒜氨酸酶基因（Alliinase）/蒜氨酸（Alliin）系統，體外黑素瘤細胞水平和建立黑素瘤荷瘤動物模型水平，用缺陷型腺病毒將該自殺基因前體藥物系統導入黑素瘤細胞後，特異性表達產生蒜氨酸酶，給予前體藥物蒜氨酸後，將前體藥物蒜氨酸轉化形成細胞毒性藥物蒜素（Allicin），檢測對黑素瘤細胞生長增殖、細胞周期及凋亡的影響，觀測對黑素瘤細胞的選擇性殺傷作用。
結題摘要
本研究以黑素瘤特異性高表達的Melanoam-inhibiting activity(MIA)蛋白的轉錄調控序列(TRS)為調控元件，成功設計受其調控的蒜氨酸酶（Alliinase）基因表達系統，用缺陷型腺病毒將該系統導入體外培養的黑素瘤細胞(A375、A875和B16-F1)後，可特異性表達產生蒜氨酸酶（Alliinase），給予前體藥物蒜氨酸(Alliin)後，可以發現對黑素瘤細胞有顯著的殺傷效應，並與病毒量和前體藥物濃度有相關性。建立黑素瘤細胞（B16-F1）荷瘤鼠C57B6和黑素瘤細胞（A375、A875）Balb/c裸鼠動物模型，用缺陷型腺病毒將該系統導入腫瘤中，分別通過尾靜脈和腹腔給予前體藥物後，可以觀察到該系統對荷瘤動物模型腫瘤生長的抑制作用。此外，本研究組還完成了以下初步探索。本課題組還研究雷公藤內酯醇在體外抑制人黑素瘤細胞A375增殖和遷移能力的效應以及對細胞表面趨化因子受體CCR7表達的影響，初步探討該效應可能相關的機制。結果示雷公藤內酯醇以劑量依賴方式抑制A375細胞的增殖，24h的IC50值為0.20μg/ml；雷公藤內酯醇能顯著地抑制A375細胞的體外遷移能力(P＜0.01)，侵襲抑制率約為82.84%；經不同濃度雷公藤內酯醇(0, 0.2, 0.4μg/ml)處理後，A375細胞中CCR7蛋白表達呈明顯下降趨勢(P＜0.05)。此研究顯示雷公藤內酯醇具有抗A375細胞增殖和體外遷移能力的作用，其機制可能與下調其表面趨化因子受體CCR7的表達相關，並且該作用呈一定的濃度依賴性。 研究小鼠黑素瘤B16F10細胞或組織中six1、VEGF-C mRNA及蛋白的表達情況，探討six1基因在小鼠黑素瘤中淋巴管生成及轉移中所發揮的作用。結論 ①Six-shRNA能有效抑制six1 mRNA和蛋白的表達。②在小鼠黑素瘤中six1、VEGF-C蛋白存在過表達。③VEGF-C mRNA和蛋白表達隨six1表達增加而增加，提示six可能與VEGF-C表達有關。④six1可能在腫瘤發生髮展、淋巴轉移中具有重要作用。⑤six1、VEGF-C有可能作為黑素瘤基因治療的重要靶點。
