《KCa3.1通道對變應性鼻炎Tfh細胞免疫調控作用及機制研究》是依託復旦大學，由鄭春泉擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：KCa3.1通道對變應性鼻炎Tfh細胞免疫調控作用及機制研究
- 依託單位：復旦大學
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：鄭春泉
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
既往研究認為，Thl/Th2細胞間的免疫反應失衡是變應性鼻炎的免疫學基礎。近年來新發現的Tfh細胞證實是輔助B細胞產生抗體及體液免疫應答最主要和最關鍵的T細胞亞群。本項目前期預實驗發現Tfh細胞在變應性鼻炎患者外周血中比例升高，說明Tfh細胞對變應性鼻炎具有一定作用。我們前期工作證明鈣離子Orail通道在變應性鼻炎小鼠鼻黏膜中表達升高，進而促進細胞外鈣離子內流導致炎症進展，採用shRNA技術下調Orail表達後，小鼠炎症相關因子降低。本項目預實驗發現鉀離子KCa3.1通道在變應性鼻炎患者及小鼠鼻黏膜中表達升高，進而促進鉀離子外流協同鈣離子內流而參與免疫反應。本項目將進一步研究KCa3.1通道對Tfh細胞免疫調控作用，構想離子改變可激活NF-κB信號通路，促進Tfh細胞活化、分泌炎症因子，影響嗜鹼性粒細胞而出現募集、脫顆粒。這些研究對深入闡明變應性鼻炎發病機制及探索基因治療具有重要意義。
結題摘要
KCa3.1通道是一種位於細胞膜上的鉀離子通道，可介導鉀離子外流及鈣離子內流。我們通過構建變應性鼻炎(Allergic rhinitis, AR)小鼠模型，檢測研究KCa3.1通道在AR小鼠模型中的表達、作用及KCa3.1通道選擇性阻斷劑TRAM-34干預作用，結果發現：KCa3.1通道在AR小鼠鼻黏膜組織中表達明顯增高，KCa3.1通道在AR發病過程中具有一定作用，TRAM-34干預可阻斷KCa3.1通道，然後引起鉀離子外流及鈣離子內流減少，從而有效地減輕小鼠AR炎症及發作症狀。我們進一步研究了慢病毒Lenti-KCa3.1-shRNA對AR小鼠模型的干預作用及機制，結果顯示：Lenti-KCa3.1-shRNA干預可阻斷KCa3.1通道，然後引起鉀離子外流及鈣離子內流減少，炎症減輕，免疫反應抑制。接著我們深入進行AR小鼠模型KCa3.1通道對Tfh細胞免疫調控機制研究，結果顯示: AR小鼠KCa3.1通道對Tfh細胞具有免疫調控作用，可能是通過NF-κB信號通路激活Tfh細胞，促進IL-21分泌，採用慢病毒Lenti-KCa3.1-shRNA干預通過影響NF-κB信號通路導致Tfh細胞活性下降，IL-21分泌降低。接著，我們分離、培養及鑑定了小鼠鼻腔黏膜中的外胚層間充質幹細胞(ectomesenchymal stromal cells, ECTO-MSCs)， 觀察其對AR小鼠的干預及機制，結果發現：小鼠鼻黏膜來源ECTO-MSCs能遷徙到AR小鼠的鼻黏膜炎症部位中。注射ECTO-MSCs能顯著改善小鼠的AR症狀，減少鼻黏膜中嗜酸性粒細胞浸潤程度，減輕鼻黏膜變應性炎症。最後我們還進行了細胞因子信號抑制蛋白3 (suppressor of cytokine signaling 3，SOCS3)介導間充質幹細胞調節免疫反應的研究，結果發現：IFN-γ能顯著提高MSCs中SOCS3的表達水平，MSCs經IFN-γ活化後能顯著抑制T細胞和B細胞(尤其是B細胞)的增殖。SOCS3可能通過細胞-細胞接觸的途徑，介導了MSCs對淋巴細胞的抑制作用。項目資助發表SCI論文6篇。培養博士生6名，其中5名已經取得博士學位，2名在讀。項目投入經費730000.00元，支出620394.50元，各項支出基本與預算相符。剩餘經費109605.50元，剩餘經費計畫用於本項目研究後續支出。
