IL-6調控膽管損傷修復相關microRNA的鑑定及功能研究

《IL-6調控膽管損傷修復相關microRNA的鑑定及功能研究》是依託浙江大學，由蔣桂星擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：IL-6調控膽管損傷修復相關microRNA的鑑定及功能研究
• 依託單位：浙江大學
• 項目負責人：蔣桂星
• 項目類別：青年科學基金項目

項目摘要

膽管損傷後修復不良是目前限制肝膽外科發展的重要因素之一。IL-6具有促膽管上皮細胞（ BEC）增殖和遷移的能力，在膽管損傷修復中起重要作用。研究顯示微小RNA（miRNAs）在組織損傷修復中扮演重要角色。本課題擬重點研究IL-6調控的miRNAs在膽管修復中的作用及分子機制。擬利用miRNA晶片、螢光定量PCR等技術，篩選並確定IL-6誘導BEC後差異表達的miRNAs；在BEC中過表達或下調侯選miRNAs，觀察其對IL-6介導的BEC增殖、遷移等的影響；採用生物信息學預測並結合報告基因檢測的方法，確定miRNA的靶基因；套用基因過表達、小RNA干擾等技術，研究miRNA靶基因在調控BEC生物學行為中的功能；建立急性膽管炎動物模型，研究體內調控miRNA對膽管損傷修復的影響。本研究將加深對IL-6調控BEC生物學行為的分子機制的認識，為膽管損傷後正常修復提供新的干預靶點。

結題摘要

膽管損傷後修復不良是目前限制肝膽外科發展的重要因素之⼀。IL-6具有促膽管上皮細胞（BECs）增殖和遷移的能力，在膽管損傷修復中起重要作⽤。研究顯示微⼩RNA（miRNAs）在組織損傷修復中扮演重要⾓色。闡明IL-6調控的miRNAs在膽管修復中的作⽤及分⼦機制具有重要的科學意義。本課題發現IL-6誘導體外BECs上皮間充質轉化（Epithelial-mesenchymal transition,EMT），促進BECs移行修復；課題組採用miRNA芯⽚、PCR等技術，篩選並確定 IL-6誘導BECs後差異表達的miRNAs，結果顯示IL- 6誘導下，BECs中miR-17、miR-21、Let-7、miR-34a、mi-155和miR-190b表達顯著增高(P＜0.05)，miR-31、miR-191、miR-335和miR-483表達顯著降低(P＜ 0.05)。在BECs中過表達或下調侯選miRNAs，觀察其對IL-6 誘導的BECs增殖、遷移等的影響，結果顯示miR-155表達升高可明顯促進BECs在IL-6刺激下的TFF3表達，促進膽管損傷修復，而相反，抑制miR-155時TFF3表達顯著減弱；採用⽣物信息學預測並結合報告基因檢測的方法，研究miRNAs靶基因在調控BECs生物學行為中的功能，研究結果顯示激活的靶基因Nrf2能夠顯著減輕膽管上皮細胞損傷，對膽管上皮細胞具有明顯保護作用；本課題組還建立了大鼠急性膽管炎動物模型，在大鼠膽管損傷模型中，下調miRNA-155表達可顯著降低膽管上皮細胞中TFF3的表達，反之上調miRNA-155表達可促進TFF3的表達，促進BECs的損傷修復。本研究加深對IL-6調控BECs⽣物學⾏為的分子機制的認識，為今後膽管損傷後正常修復提供新的干預靶點。