HRD1抵抗糖尿病視網膜病變的分子機制

《HRD1抵抗糖尿病視網膜病變的分子機制》是依託華中科技大學，由李斌擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：HRD1抵抗糖尿病視網膜病變的分子機制
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：李斌
• 依託單位：華中科技大學

中文摘要

糖尿病視網膜病變(DR)是引起失明的主要原因之一,遺傳因素在其中發揮重要作用，當前絕大部分研究集中在患糖尿病容易並發DR的患者，尋找DR易感基因，申請者將研究聚焦在患糖尿病很長時間卻未並發DR的患者，凝鍊出DR抵抗基因的思路，前期的研究顯示內質網應激相關因子在抵抗DR中發揮重要作用，本課題擬根據前期結果，鎖定內質網相關蛋白降解（ERAD）因子HRD1為突破口，建立糖尿病鼠動物模型，利用轉基因和RNAi技術，研究HRD1抵抗DR 的效果和作用途徑，以及它與P58IPK的協同作用，體外培養鼠視網膜血管內皮細胞和膠質細胞，從炎症因子、血管生長因子和內質網應激等途徑進一步研究HRD1抵抗DR 的分子機制，完善和豐富DR的發生髮展機制，尋找關鍵的DR抵抗基因,為治療DR尋找到關鍵的靶點，利用這些基因抵抗DR的發生髮展，保護糖尿病患者的視力，為治療DR尋找到一個全新的途徑。

結題摘要

背景：糖尿病視網膜病變（DR）是糖尿病的其中一個複雜的併發症，一些糖尿病人更容易發生糖尿病視網膜病變，而另外一些糖尿病人視網膜病變則非常輕微甚至沒有。一些基因因子對於DR的發病起著至關重要的作用。這些因子可以抵抗糖尿病所帶來了血管改變。我們收集了糖尿病病人的血液標本，這些病人中有些發生了DR，有些則沒有發生。通過我們的分析，特別是基因晶片技術的檢驗結果證實，基因中含有編碼SYVN1 基因可以抵抗DR。 實驗內容及結果： 通過PCR技術我們可以確定SYVN1轉基因的存在。將SYVN1轉基因小鼠與普通小鼠比較，通過進行RT-PCR技術Western blotting技術發現轉基因小鼠不管在mRNA表達還是蛋白質表達含量都增加了。當SYVN1過表達時，視網膜上的血管滲漏減少，ET-1這種血管損傷的基因標誌物表達也減少了，視網膜血管的滲漏點減少了。比較FITC血管灌注造影視網膜鋪片的結果，我們發現了SYVN1過表達的糖尿病小鼠比普通糖尿病小鼠滲漏明顯減少，p＜0.01。同時ET-1含量顯著減少，p＜0.01。SYVN1過表達糖尿病小鼠RGCs比普通鼠減少41.4%，糖尿病鼠比普通鼠RGCs減少74.4%。SYVN1過表達糖尿病小鼠比糖尿病小鼠RGCs多56.5%。結果顯示SYVN1高表達可以阻止視網膜外核層RGCs凋亡。SYVN1糖尿病鼠TUNEL陽性細胞比糖尿病鼠顯著減少19%，p＜0.05. 意義與展望： 不同信號通路的聯繫尚未明朗，值得進一步研究。並且，我們發現轉基因鼠與普通鼠之間NF-κB、CHOP、GRP48表達水平不同。這也提示我們不同的信號通路可以相互影響。因此目的基因的高表達可以影響這些信號通路。