《HPV-E6/E7通過上調AEG-1表達誘發宮頸癌的作用機制研究》是依託中國人民解放軍第四軍醫大學，由龍敏擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：HPV-E6/E7通過上調AEG-1表達誘發宮頸癌的作用機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：龍敏
- 依託單位：中國人民解放軍第四軍醫大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
高危型組贈槳人乳頭狀瘤病毒(HPV)及其表達的E6/E7蛋白為公認的宮頸癌發病誘因，但需多種內源基因參與，具體機駝嚷愉悼制及關鍵效應分子尚未完全闡明。AEG-1為新發現的與惡性腫瘤發生、發展密切相關的癌基因且其亞細胞定位與其功能發揮有關，但其在HPV所致宮頸癌中的作用及意義未見報導享習。課題組前期實驗首次發現，宮頸癌組織中AEG-1與HPV表達成平行關係；阻斷宮頸癌細胞中E6/E7表達或過表達E6/E7，可分別下調或上調AEG-1表達，提示AEG-1可能為E6/E7致癌的關鍵效應分子。本課題擬用啟動子研究技術闡明E6/E7上調AEG-1表達的分子機制；同時以具有亞細胞定位功能的ScFv分別抑制胞漿或胞核AEG-1功能發揮，驗證E6/E7高表達狀態下AEG-1功能消失對逆轉細胞惡性表型影響，確定AEG-1為HPV致癌的關烏循舟鍵效應分子嚷端棵。最終為豐富灶設企估E6/E7致癌機制的理論、發掘宮頸癌診治新靶點提供理論及實驗依據。
結題摘要
高危型人乳頭狀瘤病毒(HPV)及其表達的E6/E7蛋白為公認的宮頸癌發病誘因，但需多種內源基因參與，具體機制及關鍵效應分子尚未完全闡明。AEG-1為新發現的與惡性腫瘤發生、發展密切相關的癌基因且其亞細胞定位與其功能發揮有關，但其在HPV所致宮頸癌中的作用及意義未見報導。課題組前期實驗首次發現，宮頸癌組織中AEG-1與HPV表達成平行關係；阻斷宮頸癌細胞中E6/E7表達或過表達E6/E7，可分別下調或上調AEG-1表達，提示AEG-1可能為E6/E7致癌的關鍵效應分子。本課題採用不同亞細胞定位的抗AEG-1鏈可變區抗體（ScFv）真核表達載體轉染細胞，MTT細胞增殖實驗、克隆形成實驗、劃痕實驗、western blot檢測轉染細胞中與細胞惡性表型相關的信號通路中主要信號分子PI3K, Akt1, Erk1/2等蛋白水平的變化，結果均證實HPV-E6/E7高表達條件下，抑制胞核內或胞漿內AEG-1功能可有效逆轉HPV-E6/E7誘發的腫瘤細胞惡性表型並影響其下游信號通路中效應分子的表達。進說鞏蜜一步通過螢光報告載體、CHIP及位點突變等啟動子研究手段證實，E6/E7可通過與轉錄調控因子SP1等相互作用，影響AEG-1啟動子活性，進而最終影響AEG-1表達水平。
