HIPK2在高糖介導足細胞損傷中調節機制研究

《HIPK2在高糖介導足細胞損傷中調節機制研究》是依託上海交通大學，由靳遠萌擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：HIPK2在高糖介導足細胞損傷中調節機制研究
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：靳遠萌
• 依託單位：上海交通大學

項目摘要

足細胞損傷是糖尿病腎病重要病理改變之一，在啟動腎小球硬化和蛋白尿產生中發揮關鍵性作用。近年研究已證實高糖刺激引起凋亡信號通路激活及纖維化改變是誘導足細胞損傷的重要機制。HIPK2是一種重要的轉錄輔助調節蛋白，是調控多種腎小管上皮細胞凋亡和纖維化損傷相關轉錄因子表達的關鍵性激酶，並初步證實對足細胞損傷也有一定調控作用。本課題以研究HIPK2在高糖介導足細胞損傷中的調節機制為目的，運用Real-time PCR、Western Blot、激酶活性分析、共聚焦顯微鏡、Tunel染色、腎皮質透射電鏡等方法觀察HIPK2表達改變對高糖刺激下足細胞凋亡相關蛋白、纖維化相關蛋白及其下游靶基因、裂隙膜相關蛋白、骨架相關蛋白表達的影響，明確HIPK2與足細胞損傷之間的關係，為糖尿病腎病的防治提供新的研究方向和治療靶點。

結題摘要

HIPK2（Homeodomain-interacting protein kinase 2）已被證實參與多種分化、凋亡、炎症相關分子（p53、CtBP、PML、Axin等）轉錄調控和轉錄後修飾。最新研究發現，HIPK2是參與調控多種腎臟損傷相關轉錄因子表達的上游重要蛋白激酶，對腎小管凋亡及炎症相關通路（包括TGF-β通路、NF-κB通路、Wnt/β-catenin通路、Notch通路）激活及下游轉錄因子表達發揮關鍵性調控作用。 高糖是介導早期腎臟損傷的重要刺激因素。本研究以研究HIPK2在高糖介導的足細胞凋亡及纖維化病變中的作用機制為目的，以體外培養足細胞和糖尿病小鼠模型為研究對象。主要取得以下進展： （1）高糖刺激可以引起足細胞內HIPK2表達增高。 （2）25mmol/L高糖刺激足細胞48小時後，足細胞裂孔膜標誌蛋白nephrin表達下調，損傷相關蛋白desmin及炎症相關Twist、CCL2、Hey1、Axin1表達上調。同時TGF-β通路核心蛋白Smad3和凋亡相關蛋白p53磷酸化水平升高。 （3）阻斷HIPK2表達可抑制高糖介導的足細胞損傷相關蛋白desmin、Twist、CCL2、Hey1表達上調，並抑制smad3、p53磷酸化激活，上調保護性蛋白nephrin表達； （4）以8周齡HIPK2野生型和基因敲除型小鼠為研究對象，採用低劑量鏈脲佐菌素STZ多次注射方法誘導構建糖尿病小鼠腎病模型。利用免疫螢光法發現糖尿病HIPK2-/-小鼠腎小球內足細胞裂孔膜標誌蛋白P-cadherin的表達較糖尿病HIPK2+/+小鼠上調，損傷相關蛋白desmin表達下調。 以上研究結果充分證實HIPK2對高糖介導足細胞損傷發揮重要調控作用。後續研究將以足細胞特異性敲除HIPK2小鼠為研究對象，通過體內研究深入探討糖尿病狀態下HIPK2在對足細胞作用機制。