HIF-1a對卵巢黃體發育過程中VEGF依賴性血管增生的調控機制

《HIF-1a對卵巢黃體發育過程中VEGF依賴性血管增生的調控機制》是依託福建師範大學，由王正朝擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：HIF-1a對卵巢黃體發育過程中VEGF依賴性血管增生的調控機制
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：王正朝
• 依託單位：福建師範大學

項目摘要

黃體是一種暫時性的分泌器官，在雌性生殖周期調控及早期妊娠的建立與維持中起重要作用。目前有關研究還僅停留在VEGF水平，但近年來轉錄因子HIF-1a的發現及其功能的研究將為這一領域揭開新的篇章。本項目以前期體外培養實驗為基礎，通過成年大鼠卵巢周期黃體發育模型和eCG-hCG誘導的未成熟大鼠假性妊娠黃體發育模型，利用藥物處理及外源基因的瞬時表達，通過分子生物學手段從組織形態、卵巢功能、血管增生、蛋白定位、基因調控這五個層次上對信號通路新蛋白HIF-1a在黃體形成與發育過程中調控VEGF依賴性血管增生的作用機制進行深入細緻的研究，旨在建立生殖激素LH/hCG或缺氧-HIF-1a-VEGF-血管增生-黃體發育這一遺傳通路。我們的研究將為理解卵巢黃體形成與發育的分子機制提供新的實驗數據和理論基礎，揭示操縱黃體功能的臨床意義，有助於開發新型的避孕措施及為治療黃體相關的不孕症提供新策略。

結題摘要

在哺乳動物卵巢中，黃體是一種暫時性的分泌器官，在雌性生殖周期調控過程中起著重要的作用，是由破裂排卵後的卵泡所形成；同時也是血管增生比較激勵的地方。早期黃體快速形成緻密的毛細血管網可以確保產生激素的細胞獲得氧氣、營養和合成激素所必要的前體，同時釋放大量的激素用於早期妊娠的建立和維持。由此可見，黃體早期的血管增生在黃體形成、發育及其功能具有非常重要的作用。目前的研究已表明VEGF在血管增生過程中具有非常重要的作用，但是其是如何參與黃體血管增生的分子調控機制仍不是很清楚。直到近年來有關轉錄因子HIF-1a的研究為其進一步提供了重要線索。黃體細胞體外培養試驗結果表明在缺氧條件下HIF-1a直接參與調控VEGF的轉錄；進一步研究發現HIF-1a還直接參與生殖激素誘導VEGF表達的過程，但仍需要體內試驗結果來證明HIF-1a在黃體形成及其功能調節中的作用。 首先，通過周期性黃體形成的動物模型對HIF-1a在卵巢細胞中的表達及其定位進行分析，發現HIF-1a主要在卵巢顆粒/黃體細胞中表達，這為下一步分子機制研究提供了重要的線索。為了研究HIF-1a信號通路在周期性黃體形成及其功能調控中的作用，本實驗還通過HIF-1a小分子抑制劑Ech對實驗動物進行處理，通過RT-PCR檢測HIF-1a和VEGF mRNA的表達變化，通過蛋白印跡檢測HIF-1a蛋白的表達變化，同時還通過EIA/RIA檢測了血漿或卵巢中孕酮與雌激素的變化情況，最終闡明了HIF-1a可以通過調節卵巢細胞VEGF的表達參與卵巢功能的調節。其次，通過假性妊娠黃體形成的動物模型對HIF-1a 的作用進行了研究，實驗方法同上，研究發現HIF-1a同樣是通過調節VEGF的表達參與假性妊娠黃體的形成及其功能調節。最後，通過沉默HIF-1a對上述結果進行了驗證。 本項目利用不同的動物模型以及現代生化與分子生物學技術，對HIF-1a信號通路在哺乳動物卵巢黃體發育過程中的調控作用進行了系統的研究，建立了卵巢HIF-1a信號通路與卵巢黃體功能之間的分子調控機制—HIF-1a/VEGF信號通路。這一研究成果將有助於我們進一步理解黃體功能不全的現象，揭示操縱黃體功能的臨床意義；同時有助於提高人類不孕症的防治、避孕手段的開發、動物繁殖的調控和一些卵巢功能障礙的治療等新措施。