HIF-1α介導氟西汀改善缺血性中風患者運動功能的分子機制

《HIF-1α介導氟西汀改善缺血性中風患者運動功能的分子機制》是依託上海交通大學，由王喬樹擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：HIF-1α介導氟西汀改善缺血性中風患者運動功能的分子機制
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：王喬樹
• 依託單位：上海交通大學

項目摘要

在腦梗死恢復期給予氟西汀可以明顯改善患者運動功能，但氟西汀的作用機制尚不清楚。我們的前期研究結果顯示：氟西汀可以通過上調缺氧誘導因子-1α（HIF-1α），促進Netrin和VEGF等下游蛋白的表達；我們對Netrin蛋白的研究證明：Netrin蛋白受體存在於神經元、膠質細胞和血管內皮，通過腦內Netrin高表達可以改善腦缺血小鼠模型的行為學評分，縮小梗死面積及促進血管生成。因此，本研究計畫通過細胞生物學、分子生物學、行為學、形態學等多種研究手段，從細胞和整體水平研究HIF-1α介導氟西汀發揮作用的詳細分子機制，並探討Netrin和VEGF如何通過其下游受體DCC、UNC、DOCK180等促進神經重構或血管再生，力圖闡明氟西汀發揮作用的分子機制，希望發現新的信號通路，為研發新的神經康復藥物奠定基礎。

結題摘要

在腦梗死恢復期，氟西汀可以明顯改善患者運動功能。本課題通過綜合分子生物學、細胞生物學、行為學、形態學等多種手段，以神經生物學、神經病學前沿研究成果為指導，對HIF-1α介導氟西汀改善缺血性中風患者運動功能的分子機制進行了初步研究。本實驗首先通過PCR和Western blotting檢測SH-SY5Y細胞體外缺氧對VEGF和Netrin表達的影響；螢光素酶報告基因鑑定VEGF和Netrin基因啟動子中HIF-1a的結合位點；染色質免疫沉澱（ChIP）測定觀察氟西汀對HIF-1a與Netrin和VEGF啟動子在低氧中結合的影響。結果證明HIF-1α調節VEGF和Netrin的轉錄，缺氧條件下氟西汀通過結合VEGF和Netrin啟動子的缺氧反應元件位點來上調HIF-1a，從而促進VEGF和Netrin的表達。然後通過構建短暫性缺血再灌注大鼠模型，發現氟西汀治療能促進血管再生，減少凋亡，改善神經運動功能恢復，減少梗死後的繼發性損傷。項目資助發表核心論文2篇，SCI 5篇。培養碩士生4名，其中3名已經取得碩士學位，1名在讀。項目投入經費70萬元，支出23.5933萬元，各項支出基本與預算相符。剩餘經費46.4067萬元，剩餘經費計畫用於本項目研究後續支出。