《HDGF促進Ewing肉瘤侵襲轉移的作用及機制》是依託中山大學，由楊颺擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：HDGF促進Ewing肉瘤侵襲轉移的作用及機制
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：楊颺
- 依託單位：中山大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
轉移是Ewing肉瘤患者預後差的關鍵因素，因此探尋Ewing肉瘤轉移的核心機制是臨床的迫切需求。我們前期研究發現：HDGF在Ewing肉瘤中呈高水平表達並發揮致瘤基因的作用，且與患者總生存率顯著相關，是Ewing肉瘤患者的獨立預後因子[J Pathol. 2013]。近期的預實驗結果進一步發現：HDGF促進了Ewing肉瘤細胞體外侵襲及遷移並且與Ewing肉瘤患者的遠處轉移及無轉移生存率低顯著相關；上述作用可能是通過調控一組促轉移基因而實現的。本項目擬採用Chip-sequencing、luciferase等技術深入探究HDGF調控Ewing肉瘤侵襲轉移的關鍵靶基因和具體分子機制，並通過體外、體內實驗及臨床標本分析進一步探討HDGF及其靶基因作為Ewing肉瘤轉移標誌物的可能性和臨床套用前景。本項目將有助於闡明Ewing肉瘤的侵襲轉移機制，並為Ewing肉瘤轉移患者的靶向治療提供新的思路。
結題摘要
Ewing肉瘤是好發於兒童及青少年的骨及軟組織的高度侵襲性腫瘤，轉移是Ewing肉瘤患者最不利的預後因素，然而，發生轉移的分子機制迄今未明。我們前期研究發現：核轉錄因子HDGF在Ewing肉瘤中常常高表達，且是重要的致瘤基因。在本研究中，我們的數據顯示，HDGF可促進Ewing肉瘤細胞體外轉移相關性能的上調，包括誘導肌動蛋白細胞骨架重構和黏著斑形成，增加細胞與基質間的粘附能力，從而促進Ewing肉瘤細胞體外運動、侵襲及遷移；在實驗性轉移模型中，HDGF促進了Ewing肉瘤細胞的體內轉移。為探索HDGF促進Ewing肉瘤細胞侵襲及轉移的潛在機制，我們使用Chip-sequencing技術於全基因組範圍內探尋HDGF的結合位點，並分析人Ewing肉瘤細胞中HDGF表達敲低後的基因表達譜，對兩組數據進行整合、比對，從而鑑定HDGF的靶基因及下游信號網路。我們發現，HDGF調控了一組轉移相關基因，這些基因或參與細胞骨架重構，或參與黏著斑形成，使用Real-time PCR技術驗證HDGF基因敲除後，這些轉移相關基因表達水平的變化，其中，ALCAM的表達變化最為顯著，當HDGF基因敲除後，ALCAM基因的表達水平約上調了4倍，Chip-qPCR檢測結果進一步證實HDGF靶向結合ALCAM基因的啟動子區域，而敲低ALCAM基因表達的Ewing肉瘤細胞則呈現出更多間充質細胞來源的特徵—形成更多的黏著斑和肌動蛋白應力纖維，並具有更強的基質粘附能力，因而，ALCAM可能是HDGF下游關鍵的效應分子，介導了HDGF對Ewing肉瘤細胞侵襲及轉移過程的調控。此外，在臨床標本中，HDGF核內高表達的Ewing肉瘤患者，其遠處轉移發生率顯著增高，無轉移生存時間顯著縮短。因而，我們的研究結果強有力地支持HDGF有作為Ewing肉瘤轉移標記物和預後因子的潛在套用前景，並可為Ewing肉瘤轉移患者的靶向治療提供新的思路。
