《H5N1禽流感病毒血凝素廣譜中和表位的結構研究》是依託廈門大學，由陳毅歆擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：H5N1禽流感病毒血凝素廣譜中和表位的結構研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：陳毅歆
- 依託單位：廈門大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
本研究擬在課題組前期研究工作基礎上將自行研製的H5N1禽流感病毒血凝素蛋白（HA）的廣譜中和單抗和具有天然活性的H5N1禽流感病毒重組血凝素蛋白（rH5 HA1）進行晶體培養，利用晶體X射線衍射技術、分子模擬和分子對接方法，並結合已有的HA1定點突變及表達純化技術、血凝抑制試驗、體外中和實驗和動物保護實驗等驗證手段，開展H5N1禽流感病毒血凝素廣譜中和表位結構研究，認識H5N1病毒HA上保守的廣譜中和表位的空間分布結構。本研究結果將有助於闡明H5N1禽流感病毒HA上廣譜中和表位結構特徵、H5廣譜中和單抗治療機制、為疫苗和藥物的分子設計奠定基礎，也為其它亞型流感病毒的中和表位研究提供技術平台。
結題摘要
本課題組在前期研究中發現一個對Clade 0-8十個變異分支的40個H5N1禽流感病毒代表株均有中和活性的廣譜中和單抗13D4，為進一步認識單抗13D4所識別的中和表位的結構特徵，本研究擬通過晶體培養和晶體X射線衍射技術揭示單抗13D4識別表位的三維結構，同時探索利用分子模擬、分子對接和定點突變等方法預測單抗13D4識別表位結構的可能性。課題組首先表達並製備了高純度的源自H5N1病毒YU22株的重組血凝素蛋白（rH5 HA1）和高純度的H5血凝素廣譜中和單抗13D4的Fab片段，然後通過摸索晶體培養條件，獲得了13D4 Fab的晶體並成功解析出該單抗的三維結構，積累晶體培養和結構解析的研究經驗。目前還獲得了單抗13D4 Fab與rH5 HA1的複合物晶體，正在等待衍射實驗，為下一步揭示13D4識別表位的晶體三維結構奠定堅實基礎。本研究還利用分子模擬和分子對接技術獲得單抗13D4 Fab和YU22 HA的分子對接結構模型，通過突變證實了分子對接預測的胺基酸位點是13D4與HA的結合位點，為探索利用分子模擬方法預測表位結構的研究積累了經驗。
