《GPR40介導的團頭魴beta細胞胰島素分泌及脂性凋亡的調控機制》是依託上海交通大學，由徐維娜擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：GPR40介導的團頭魴beta細胞胰島素分泌及脂性凋亡的調控機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：徐維娜
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
G蛋白偶聯受體 40（G protein-coupled receptor 40）是中長鏈游離脂肪酸特異性受體。脂肪酸可通過該受體調控胰島β細胞胰島素的分泌。本項目以GPR40為靶標，分別套用cDNA末端快速擴增（RACE）技術和實時螢光定量PCR技術克隆團頭魴GPR40的全長基因序列及組織中的差異性表達，構建GPR40 cDNA文庫和組織表達圖譜。利用體外培養的胰島β細胞，套用免疫放射、螢光實時定量PCR及免疫化學方法檢測不同濃度脂肪酸和葡萄糖對細胞胰島素分泌、GPR40表達量和其在細胞膜表面的表達定位。套用siRNA技術抑制細胞膜GPR40的表達，探討GPR40對β細胞胰島素分泌和細胞脂性凋亡的調控作用以及GRP40如何通過ERK1/2途徑參與細胞凋亡的調控過程，為研究團頭魴糖和脂肪利用及其引起的營養代謝障礙提供新的思路和研究方法，也為團頭魴高能低蛋白日糧的開發提供理論依據。
結題摘要
項目組根據計畫書要求，以團頭魴為模式動物，套用高脂誘發魚類營養性脂肪肝，比較分析了哺乳動物和魚類在脂肪和糖代謝紊亂情況下機體生理指標的差異，以調節脂肪代謝為研究切入點，以G 蛋白偶聯受體為靶標，借鑑哺乳動物的相關研究方法， 探討G 蛋白偶聯受體介導脂肪酸對細胞脂肪代謝和細胞脂性凋亡的調控作用以及其信號調控通路，為研究團頭魴糖和脂肪利用及其引起的營養代謝障礙提供新的思路和研究方法，也為高能低蛋白飼料的開發提供科學依據。項目按照原計畫書內容實施，具體開展以下幾方面的工作：1. 團頭魴GPR43 基因克隆及其組織表達差異性分析。2.黃連素介導p38對高脂誘導的團頭魴GPR43基因mRNA表達量的影響。3. 黃連素對游離脂肪酸誘導的淡水魚類肝細胞氧化應激、細胞凋亡及脂肪沉積的影響。 此外，項目在原計畫書的基礎上，根據實際試驗進展和結果對原計畫書以外內容試做了必要的延伸工作，包括1. 團頭魴微管相關蛋白輕鏈3(LC3B)基因克隆及組織分布。2. 黃連素不同投餵模式對團頭魴生長、氧化應激和免疫性能的影響。這部分工作是本項目內容以外延續性探索，不僅在能從分子機制上更好的解釋魚類營養性脂肪過量沉積原因。 項目組超額完成計畫書內容，在水產營養及生理生化高水平SCI期刊上共發表研究型論文4篇，中文核心期刊2篇（見成果附錄）。培養青年優秀科研人員2名（晉升為副教授），博士2名（已畢業），碩士2名（現已為在讀博士研究生）。
