《Flowering Locus T mRNA長距離移動的分子機理研究》是依託杭州師範大學，由俞志明擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：Flowering Locus T mRNA長距離移動的分子機理研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：俞志明
- 依託單位：杭州師範大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
FT蛋白質作為開花素信號分子的重要組成部分已被廣泛接受，但是其長距離移動的機制還未知。最新結果顯示FT mRNA具有誘導開花的功能，並能獨立於FT蛋白質進行長距離移動。本項目將從FT mRNA長距離移動的現象入手，將揭示其長距離移動的分子基礎。利用RNA螢光技術，建立FT mRNA螢光觀察系統，將提供FT mRNA長距離移動的直接分子證據；通過基因克隆以及病毒學導向的反向遺傳學技術，明晰FT同源基因mRNA誘導開花功能及長距離移動的特性；採用RNA二級結構預測方法結合病毒學技術，解析結構與移動性的關係，獲得具有移動特性的RNA保守結構模型。通過本項目的研究，將掀起對FT mRNA與相關蛋白質在長距離移動並誘導開花過程中相互作用機制研究的熱潮。
結題摘要
構建PVX介導的核酸適配體Spinach1載體，轉錄成RNA後體外螢光觀察，發現隨著Spinach1數量的增加，類似GFP的螢光信號也得到了增強。將重組PVX/Spianch1的RNA分子接種N.B.菸草，提取系統幼葉的總RNA後，可以在體外觀察到類似GFP螢光，其螢光信號強度與Spinach1呈線性關係。該結果證實了Spinach1可以在植物體內穩定存在，且隨著串聯數量的增加，螢光強度增加。本研究為能在植物體內觀察到RNA螢光信號奠定了紮實的基礎。構建PVX/ΔCP介導的FT(102)截斷序列載體，通過RT-PCR的檢測發現FT(102)-5’-60及FT(102)-60-3’均能從接種葉片到系統幼葉進行長距離移動，由於RNA結構預測與其長距離移動之間沒有可以研究的切入點，因此也預示著有關RNA移動的後續研究還需要引進新的更敏感的檢測技術手段。現有報導已經證實，擬南芥韌皮部含有大量的mRNA。通過構建PVX重組載體，篩選了107個韌皮部檢測到的基因。得到具有7組有不同類型表型的相關基因。著重對其中兩個基因，RPL10A以及ARF1進行了深入研究。已有報導證實RPL10A參與植物對DNA病毒的抗性調控。而本研究發現RPL10A可能參與植物對RNA病毒的抗性機制中。核糖基化因子ARF1是一類具有信號傳遞功能家族的成員之一，在人類及動物中的有比較深入的研究。而在植物中的報告還很少，本研究發現ARF1對抗RNA病毒中，可能是通過線粒體途徑而達到耐受的目的。
