《FSH抑制豬顆粒細胞中促凋亡蛋白Bim表達的分子機制》是依託中國農業大學，由曾申明擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：FSH抑制豬顆粒細胞中促凋亡蛋白Bim表達的分子機制
- 依託單位：中國農業大學
- 項目負責人：曾申明
- 項目類別：面上項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
為探討促凋亡蛋白Bim在卵泡閉鎖中的作用，以及FSH調控豬顆粒細胞中Bim表達的分子機制，課題組將在前期工作的基礎上，首先，採用TUNEL和免疫組化等技術確認Bim蛋白的表達水平與卵泡發育狀況的相關性；然後，用已建立的豬顆粒細胞體外培養模型，探討FSH濃度與顆粒細胞凋亡、Bim基因表達水平的關係；接著，分別用添加PI3K、MAPK和ERK激酶通路抑制劑的培養液，通過凋亡檢測篩選FSH對Bim調控的主要路徑；再結合基因超表達、RNA干涉以及Western Blot等技術，探索FSH對Bim調控的關鍵因子；最後，採用免疫組化技術觀察關鍵調控因子表達水平與豬卵泡閉鎖狀態的關係，驗證此通路在活體中是否存在。研究結果將從細胞凋亡角度揭示FSH與卵泡發育或閉鎖的分子聯繫，豐富哺乳動物的卵泡閉鎖理論。同時，通路中發現的關鍵因子可能為控制哺乳動物卵泡發育藥物的研發提供新的靶點。
結題摘要
本課題首先分析了bim基因在豬顆粒細胞中的表達水平與卵泡閉鎖的關係。然後，依據顆粒細胞和卵丘細胞對不同激素或因子敏感性差異，採用原代顆粒細胞血清飢餓培養和去除卵母細胞的卵丘細胞複合體培養為模型，分別研究了FSH和生長分化因子9(GDF9)對顆粒細胞和卵丘細胞中bim基因表達及凋亡的影響。最後，深入研究了FSH和GDF9調控bim基因表達的分子通路。研究結果表明，卵泡體細胞中bim基因的表達水平與豬卵泡閉鎖狀態密切相關，bim表達水平升高，卵泡閉鎖，反之，卵泡發育正常；超表達BimEL蛋白能導致體外培養的豬顆粒細胞凋亡。FSH和GDF9分別通過抑制顆粒細胞和卵丘細胞中BimEL蛋白表達來阻止細胞凋亡，並且這種抑制作用是通過PI3K/Akt/FOXO3a信號通路來實現的。本項目發現了FSH和GDF9新的生物學功能和其分子機制，並提出bim基因在豬卵泡閉鎖過程中發揮關鍵作用。在項目完成期間，已發表SCI研究論文5篇，獲得國家發明專利1項，培養10名研究生，受邀國際學術會議學術報告1次。
