《FC-99通過miR let-7調控巨噬細胞IL-6緩解RA的作用機制研究》是依託南京大學，由竇環擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：FC-99通過miR let-7調控巨噬細胞IL-6緩解RA的作用機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：竇環
- 依託單位：南京大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
類風濕性關節炎（RA）易復發及致殘率高，目前尚缺有效的治療手段。我們首次發現煙麴黴文丙衍生物（FC-99）具有抗RA作用。有趣的是，我們預實驗的結果表明，當FC-99處理激活的巨噬細胞時，miR let-7 表達明顯升高，而 IL-6表達降低；體內實驗也表明FC-99可緩解炎症性組織損傷。可是，FC-99是如何通過miR let-7調控其靶基因發揮抗RA作用的機制不明。故我們推測：FC-99通過上調miR let-7的表達靶向IL-6基因，從而抑制IL-6與 PI3K/AKT和NF-κB信號通路之間的反饋活化而發揮其抗RA作用。本研究擬利用多種小鼠實驗性關節炎模型及RA患者滑膜樣本，評價FC-99抗RA的效果；採用干擾和過表達技術進行體內外試驗，分析FC-99對巨噬細胞IL-6表達與PI3K/Akt及NFκB活性變化的相關性及其作用機制。本研究的完成將為研發抗RA新藥提供重要依據。
結題摘要
類風濕性關節炎（RA）易復發及致殘率高，目前尚缺有效的治療手段。本研究在FC-99抑制巨噬細胞產生IL-6等炎性因子的基礎上，基於多種免疫疾病小鼠模型，試圖篩選並評價FC-99是否具有抗RA等免疫炎性損傷的治療效果，並對其抗RA等機制進行深入研究。 本研究建立了高收率、低成本製備小分子化合物FC-99的方法；成功複製多種急慢性免疫性疾病的動物模型，鑑定了FC-99的治療作用；探索了以巨噬細胞為核心的免疫調控評價方式；揭示了FC-99發揮抗炎作用的具體機制。（1）發現FC-99能夠較好的阻斷巨噬細胞產生炎性因子、抑制Th17細胞的分化，改善小鼠RA的症狀。進一步揭示FC-99治療RA的作用機制主要是通過促進巨噬細胞的miR-494產生，並使其負向調控TN-C在炎性部位的表達，進而調控RORγt抑制Th17細胞分化，發揮較強的促進RA小鼠免疫平衡的作用。（2）發現let-7a是FC-99調控巨噬細胞命運的關鍵分子，可較好的防止膿毒症小鼠肝功能衰竭。進一步揭示FC-99治療肝損傷的作用機制主要是通過誘導單核細胞高表達let-7a，靶向抑制抗凋亡基因BCL-XL的表達，促進單核細胞凋亡，阻斷單核/巨噬細胞分化，從而明顯減少外周血中Ly6Chi炎性單核細胞亞群比例，促進肝臟內浸潤單核細胞積累，減少其向F4/80lo巨噬細胞分化，發揮較強的抑制肝臟免疫炎性損傷的作用。（3）發現FC-99可有效阻斷TLR/IRAK4/BAFF信號軸，明顯抑制pDC細胞的表達和分泌IFN-α，大大減弱DCs細胞的活化，具有較強的改善MRL/lpr小鼠狼瘡樣症狀的功能。（4）確認FC-99調控巨噬細胞TLR2/TLR4信號通路治療DSS誘導的小鼠腸炎模型症狀。（5）發現FC-99的類似物FC-98可通過抑制MyD88和TRIF依賴的信號通路明顯改善CLP小鼠膿毒症損傷症狀。本研究的完成將為研發抗RA新藥提供重要依據。
