《FAK選擇性剪接體Δ26FAK與乳腺癌轉移的關係及其機制研究》是依託復旦大學，由姚玲擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：FAK選擇性剪接體Δ26FAK與乳腺癌轉移的關係及其機制研究
- 依託單位：復旦大學
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：姚玲
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
乳腺癌相關基因的選擇性剪接體在乳腺癌發生髮展中起著重要作用。黏著斑激酶(FAK)是一種與乳腺癌轉移及預後密切相關的非受體蛋白酪氨酸激酶。我們前期研究提示它的選擇性剪接體Δ26 FAK與乳腺癌的轉移有關，但具體作用機制及它的形成原因還有待進一步探討。我們推測Δ26 FAK可能因為第26個外顯子缺失引起蛋白質分子構象改變，導致它的持續激活及與下游蛋白相互作用異常而促進乳腺癌轉移；Δ26 FAK的形成或與基因突變及反式作用因子SF2/ASF的表達水平有關。我們將通過RT-PCR、Western Blot、IP、EMSA、免疫螢光、Transwell等從分子、細胞、組織以及動物水平等多方面探討Δ26 FAK在乳腺癌轉移中的作用及Δ26 FAK的形成原因。本研究從選擇性剪接這個視點為揭示乳腺癌轉移機制奠定基礎，以選擇性剪接蛋白為藥物靶點或糾正剪接調控機制為治療乳腺癌轉移提供新途徑。
結題摘要
乳腺癌相關基因的選擇性剪接體在乳腺癌發生髮展中起著重要的作用。我們新發現的黏著斑激酶(FAK)的異常選擇性剪接體Δ 26 FAK 與乳腺癌發生髮展有關。通過RT-PCR及DNA測序等方法對102例乳腺癌標本及配對的52例癌旁組織進行檢測發現了Δ 26 FAK，在MCF-10A細胞中過表達Δ 26 FAK，然後通過免疫共沉澱以及Western Blot等方法檢測激酶活性，免疫螢光等檢測它在細胞內的定位，Transwell檢測細胞遷移能力，並用流式細胞技術，TUNEL等方法檢測細胞凋亡水平。結果提示Δ 26 FAK與野生型FAK具有相似的生物學功能，但是比野生型FAK具有更強的抑制細胞凋亡的能力。因為野生型FAK會被caspase降解而Δ 26 FAK則會持續存在並激活，從而發揮抑制細胞凋亡的作用。
