EphrinB2/蠶絲組織工程神經的研究

《EphrinB2/蠶絲組織工程神經的研究》是依託西南大學，由劉彬擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：EphrinB2/蠶絲組織工程神經的研究
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：劉彬
• 依託單位：西南大學

項目摘要

目前，人工神經內部結構的缺陷是導致其對周圍神經缺損修復效果差的主要原因。這些缺陷主要體現在不能為軸突的生長進行約束 和誘導，以及不能保障物質交換和誘導血管生成。 為了克服這些問題，本研究用去絲膠蠶絲製備對ephrinB2具有緩釋功能的絲狀載體，再將其按不同方式組裝進不同尺寸的PLGA導管中，作為人工神經以橋接周圍神經缺損,以篩選出人工神經內部的最佳結構。單根絲狀ephrinB2載體之間所形成的縫隙既是軸突生長的微通道，也是人工神經內部進行物質交換的通道。通過ephrinB2的持續釋放，誘導軸突有序生長及微血管生成。通過體外測試及動物實驗，研究人工神經內部微通道的結構對軸突有序生長、物質交換、血管生成等所決定的周圍神經缺損修復效果的影響。從而進一步揭示周圍神經缺損修復機理，並為ephrinB2/蠶絲組織工程神經的臨床套用奠定基礎。

結題摘要

為了探討蠶絲的結構與降解性質，在本研究中用掃描電子顯微鏡和冰凍切片方法觀察蠶絲的結構。以蠶絲和經脫絲膠處理的蠶絲為材料，考察它們在體外分別在4種降解液里156天中的降解性質。通過在SD大鼠皮下埋植，取材 進行冰凍切片觀察。結果說明絲素蛋白和絲膠蛋白的免疫原性無顯著差異。蠶絲在體外降解的實質是水解作用，酶的作用並不顯著。蠶絲在體內的降解不是一個勻速的過程，其降解進程應該與細胞的動員有關，成纖維細胞參與此過程並分泌膠原蛋白。本研究還展示了由絲蛋白到蠶繭和生絲的組裝過程。 為了探討人工神經結構對周圍神經缺損修復效果的影響，為人工神經的設計提供參考依據。本研究用蠶絲纖維和聚乳酸為材料製備了4種具有不同結構的人工神經，即管壁有微米級孔隙的神經導管CP和管壁無微米級孔隙的神經導管Con ， 分別在神經導管CP 和Con 中填充6000根蠶絲纖維以製備成神經支架CPM和CM。以自體神經移植（Aut）為對照，分別將它們移植於大鼠10 mm 坐骨神經缺損處。本研究結果提示，人工神經管壁中微米級孔隙的存在對周圍神經缺損修復具有負面影響，人工神經內部微通道的存在對周圍神經缺損修復是有益的。 為了探討化學處理對蠶絲降解性質的影響，本研究採用氫氧化鈉、氫氧化鈣、鹽酸、醋酸、磷酸、碳酸氫鈉和氯化鈣對絲素蛋白纖維進行處理，考察其力學性質的變化以及體內外降解性質。本研究結果提示，本試驗中所使用的酸、鹼和鹽溶液均可以不同程度地降解蠶絲，會不同程度地影響其力學性質，但是並不能顯著影響蠶絲在體內的降解速率。這一觀點的意義在於兩個方面，其一，對於人工韌帶和人工血管等人們不希望在體內迅速降解的移植體而言，人們不需要太耽心蠶絲所製備的上述材料在體內的降解問題。另一方面，對於人工神經等移植體而言，如果採用蠶絲作為材料，就會面臨神經再生後蠶絲不能及時降解的問題。 從基因的角度研究動物再生機理是目前的熱點。在周圍神經缺損修復研究方面，目前未見有從轉錄組層面進行探討的研究報導。通過本項目的開展，我們意識到了轉錄組層面研究的重要意義，為此我們已經初步開展了周圍神經缺損修復的轉錄組分析，並以此為基礎啟動了周圍神經缺損修復的分子機制的研究。