DNA解旋酶RECQL1在HBx誘導肝癌發生中的作用及分子機制研究

《DNA解旋酶RECQL1在HBx誘導肝癌發生中的作用及分子機制研究》是依託湖北大學，由李春華擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：DNA解旋酶RECQL1在HBx誘導肝癌發生中的作用及分子機制研究
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：李春華
• 依託單位：湖北大學

項目摘要

B型肝炎病毒（HBV）感染是肝癌發生的主要誘因，其編碼的x蛋白（HBx）在HBV誘導肝癌的發生中發揮著重要作用。染色體的不穩定性提高是腫瘤形成的重要機制之一。HBx的表達可促進細胞染色體不穩定性的發生，進而誘導肝癌的發生。目前關於HBx降低細胞染色體的穩定性並誘導肝癌形成的分子機制還不甚清楚。RECQL1可有效抑制染色體不穩定性的發生，且與癌症的發生高度相關。為了進一步探索HBx促進肝癌發生的分子機制，本課題擬在發現並初步驗證HBx與RECQL1間相互作用的基礎上，通過研究HBx對RECQL1抑制染色體不穩定性功能的干擾而促進肝細胞的惡性轉化，來闡明HBx的致癌性與RECQL1間的相關性，從而揭示HBx促進肝癌發生的一種新機制。本研究結果將促進對HBx的生物學功能、HBV感染誘導肝癌發生機制、HBV與宿主相互作用的理解與研究，並為相關藥物的篩選提供理論依據。

結題摘要

B型肝炎病毒（HBV）感染是肝癌發生的主要誘因，其編碼的x蛋白（HBx）在HBV誘導肝癌的發生中發揮著重要作用，但其詳細分子機制尚不甚明晰。RECQL1是一種重要的腫瘤標記分子，在多種癌症組織如肝癌、肺癌、乳腺癌等組織中高豐度表達，可有效調節腫瘤細胞的增殖，在癌症的發生、發展中發揮著重要作用，同時也是一個重要的癌症治療的潛在靶位點。本研究通過酵母雙雜交、免疫共沉澱、亞細胞共定位等手段發現HBX與RECQL1間可發生離體相互作用。構建了HBX、RECQL1的不同缺失突變體，以期確定介導二者相互作用的結構域。同時，合成了超摺疊綠色螢光蛋白基因sfGFP，構建了與6XHis-sfGFP tag融合的HBX表達載體，實現了HIS-SFGFP-HBX融合蛋白在大腸桿菌中的可溶性表達和純化，為研究HBX的結構、抗體製備及檢測與RECQL1間的內源性相互作用奠定了基礎。另外，為了進一步探索HBV的致病機理，與其他單位合作完成了人肝臟蛋白質相互作用連鎖圖的構建，該成果已予以發表。由於本研究未檢測到HBX的表達對RECQL1抑制染色體異常功能的影響，同時最近的研究表明，RECQL1可調節與細胞增殖、細胞遷移、細胞侵襲相關的基因的表達水平，從而促進細胞周期進程、細胞的增殖及運動，最終促進腫瘤的形成及發展。因此，HBX可能通過與RECQL1間的相互作用而調節RECQL1的靶作用基因，改變細胞周期及細胞運動的特性，從而促進肝癌的發生與發展。