《DNA損傷下調NDRG1蛋白並誘導PKCd活化的分子機制》是依託上海交通大學，由鄭瑩擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：DNA損傷下調NDRG1蛋白並誘導PKCd活化的分子機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：鄭瑩
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
最近本課題組利用定量蛋白質組學等技術研究發現，在DNA損傷凋亡誘導劑誘導的細胞凋亡早期，NDRG1（N-myc downstream regulated gene 1）蛋白顯著下調。利用Tet-off系統誘導表達NDRG1能顯著延遲NSC606985誘導的PKCd的活化和細胞凋亡，而小分子RNA沉默NDRG1的表達則顯著促進PKCd的活化和細胞凋亡，提示在細胞凋亡過程中發揮重要作用的PKCd的剪下活化可能與NDRG1有關。相關結果已經由《PROTEOMICS》雜誌接受發表。本課題將在這些發現的基礎上，通過利用串聯親和純化和高通量質譜等技術識別NDRG1相互作用蛋白入手，深入研究DNA損傷下調NDRG1，尤其是下調的NDRG1誘導細胞凋亡相關的PKCd剪下活化的分子機制。這對於深入認識DNA損傷導致PKCd剪下活化和PKCd活化相關的細胞凋亡信號傳導機制的認識具有重要理論創新意義。
結題摘要
該課題在獲得國家自然科學基金的資助後，進展順利，按時完成了研究計畫中所要求的研究內容：(1)建立了一整套標籤表達蛋白、親和純化和通過LC-MS鑑定相互作用蛋白的技術平台，完成了NDRG1相互作用蛋白的系統識別。發現和鑑定了若干NDRG1的相互作用蛋白，在多種腫瘤細胞中發現NDRG1與PKCδ的相互作用，這對於深入認識DNA損傷導致PKCδ剪下活化和PKCδ活化相關的細胞凋亡信號傳導機制的認識具有重要理論創新意義。蛋白質-蛋白質相互作用鑑定平台的建立，為我們今後大規模尋找與疾病相關蛋白質的相互作用蛋白提供了有力的技術支持。(2) 在第一部分內容建立的前列腺癌以及結直腸癌細胞系中對NDRG1抑制轉移的機制進行了研究，發現NDRG1是通過抑制ROCK1/pMLC2信號通路抑制應力纖維介導的腫瘤細胞轉移，這為治療腫瘤轉移提供了新的線索。(3) 利用第一部分建立的鑑定相互作用蛋白的技術平台，對FBXO6的相互作用蛋白也進行了系統研究，鑑定出了三種細胞系中共有的39個與FBXO6相互作用的蛋白，並發現其中74%是糖蛋白。同時，我們發現FBXO6是一個新的細胞周期磷酸化蛋白，對有絲分裂檢查點蛋白的失活起到了重要的調控作用，提示FBXO6可能參與了腫瘤細胞的凋亡和耐藥性，以上的研究提示FBXO6本身可能是一個很重要的藥物靶標。本課題目前在國際重要刊物上發表2篇學術論文，在細胞凋亡、細胞周期和腫瘤細胞轉移的發生以及調控機制方面提出若干新觀點，這些原創性結果不僅可能為治療腫瘤及抑制腫瘤轉移提供新的線索，而且進一步拓展了NDRG1以及FBXO6的生物學功能。
