《D-硝基精氨酸體內單向手性轉化機制的研究》是依託上海交通大學，由郝彬擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：D-硝基精氨酸體內單向手性轉化機制的研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：郝彬
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
D-胺基酸在生物體內的生物學功能正受到越來越多的重視，但在體內的代謝通路並不完全清楚。本項目組在國際率先發現D-硝基精氨酸（D-NNA）的體內手性轉化，並提出D-NNA手性轉化的兩步反應機制：即D-NNA首先在D-胺基酸氧化酶（D-amino acid oxidase，DAO）作用下氧化脫氨生成α-酮酸（nitro-5-gunidino-2-oxopentanoic acid），後者在轉氨酶參與下，通過立體選擇性獲取氨基生成L-NNA（Xin et al.，2005，2007）。本研究在此基礎上，將利用DAO 活性缺失（ddY/DAO-/-）小鼠進一步證實DAO 在D-NNA的手性轉化過程中的作用，再利用基因沉默技術（RNA干擾）和酶抑制劑確定參與D-NNA手性轉化的轉氨酶特異亞類，期望完整地闡明D-NNA的體內手性轉化機制，為D-胺基酸體內代謝揭示新的通路。
結題摘要
D-胺基酸在生物體內的生物學功能正受到越來越多的重視，但在體內的代謝通路並不完全清楚。本項目組在國際率先發現D-硝基精氨酸（D-NNA）的體內手性轉化，並提出D-NNA手性轉化的兩步反應機制：即D-NNA首先在D-胺基酸氧化酶（D-amino acid oxidase，DAAO)作用下氧化脫氨生成α-酮酸（nitro-5-gunidino-2-oxopentanoic acid），後者在轉氨酶參與下，通過立體選擇性獲取氨基生成L-NNA（Xin et al.，2005，2007）。本研究在此基礎上，利用DAO 活性缺失（ddY/DAO-/-）小鼠進一步證實DAO 在D-NNA的手性轉化過程中的作用，並對大鼠和小鼠體內D－NNA及相應α-酮酸的藥代動力學進行研究，證實了轉氨酶在D－NNA手性轉化中的重要作用，利用酶抑制劑、已知轉氨酶等對參與D-NNA手性轉化的轉氨酶進行了初步研究，並進行了相應轉氨酶的分離純化及基本性質的考察，本研究完整地闡明D-NNA的體內手性轉化機制，為D-胺基酸體內代謝揭示新的通路。
