Calpain調節血小板GPIbα膜外功能區酶切的機制研究

《Calpain調節血小板GPIbα膜外功能區酶切的機制研究》是依託蘇州大學，由閆榮擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：Calpain調節血小板GPIbα膜外功能區酶切的機制研究
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：閆榮
• 依託單位：蘇州大學

項目摘要

血小板膜糖蛋白(GP)Ibα膜外功能區含有血管性血友病因子（VWF）的結合位點。GPIbα與損傷血管內皮表面VWF的結合是血栓形成的起始和關鍵步驟。然而，在生理和病理情況下，GPIbα的膜外功能區均可被ADAM17酶切，使得血小板失去參與血栓與止血的功能。到目前為止，酶切發生的機制尚未闡明。申請人研究發現，calpain對ADAM17介導的GPIbα膜外功能區酶切起重要的正調控作用。本研究將分別從calpain調節ADAM17酶活性和calpain調節GPIbα對ADAM17的敏感性兩個方面闡明其機制，並研究血小板胞內鈣離子濃度升高與GPIbα被酶切之間的關係以及calpain在其中的關鍵作用。本研究有望闡明calpain調控GPIbα膜外功能區酶切的機制，對認識病理、生理情況血小板功能的調控機制，以及研製新型抗血栓、出血藥物提供新思路。

結題摘要

血小板膜糖蛋白(GP)Ibα膜外功能區含有血管性血友病因子（VWF）結合位點。GPIbα與損傷血管內皮表面VWF的結合是血栓形成的起始和關鍵步驟。然而，在生理和病理情況下，GPIbα的膜外功能區均可被ADAM17酶切，使得血小板失去參與血栓與止血的功能。到目前為止，酶切發生的機制尚未闡明。申請人之前的研究發現，calpain對ADAM17介導的GPIbα膜外功能區酶切起重要的正調控作用。 本研究結果表明激活calpain可誘導顯著的ROS釋放，同時清除ROS可抑制calpain活化誘導的GPIbα胞外端被酶切，證明calpain通過調控活性氧簇（ active oxygen species , ROS）的釋放調控ADAM17的活性。本研究還比較了野生型與截短型及突變型GPIbα和GPIbβ細胞株中GPIbα被酶切的情況，結果表明鈣離子載體誘導野生型及截短型和突變型GPIbα的被酶切程度沒有差別，提示calpain不改變底物GPIbα對ADAM17的敏感性。本研究通過比較激動劑處理後的血小板鈣離子濃度變化和GPIbα被酶切的程度，證實血小板胞內鈣離子濃度升高可通過激活calpain誘導GPIbα被酶切，但與GPIbα被酶切並非直接相關。本研究闡明了calpain調控GPIbα膜外功能區酶切的機制，找到了calpain－X－GPIbα通路中的X因子－ROS，對認識病理、生理情況血小板功能的調控機制，以及研製新型抗血栓、出血藥物提供新思路。