CUEDC2基因敲除對Her2誘髮乳腺癌的影響及機制研究

《CUEDC2基因敲除對Her2誘髮乳腺癌的影響及機制研究》是依託中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院，由梁冰擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：CUEDC2基因敲除對Her2誘髮乳腺癌的影響及機制研究
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：梁冰
• 依託單位：中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院

中文摘要

CUEDC2是近年來發現的一個新的炎症抑制因子（Nat Immunol），並參與乳腺癌細胞生長調控（EMBO J）。本項目前期工作對400多例乳腺癌臨床標本分析發現，CUEDC2在乳腺癌中高表達，並影響乳腺癌預後。進一步機制研究表明，CUEDC2通過調控細胞周期，使細胞具有轉化能力。基於以上基礎，本項目提出進一步研究CUEDC2在乳腺癌發生、發展中的作用。主要策略是在自髮乳腺癌的Her2等轉基因小鼠中敲除cuedc2基因 （Her2在25-30%的乳腺癌中過度表達或激活突變；Her2轉基因鼠（T50 = 210天）是近年來最常用的乳腺癌動物模型之一），闡明CUEDC2是否是乳腺癌發生所必須的，及其作用機制。目前，我們已經成功製備cuedc2基因敲除小鼠，並獲得Her2轉基因鼠，在此基礎上的進一步研究有可能揭示乳腺癌發生中的一個重要分子事件，並為乳腺癌治療提供新的靶標。

結題摘要

乳腺癌是近年來女性中發病率最高的惡性腫瘤，每年約有40萬患者死於乳腺癌，CUEDC2 是近年來發現的一個新的炎症抑制因子，並參與乳腺癌細胞生長調控。本項目前期工作對400 多例乳腺癌臨床標本分析發現，CUEDC2 在乳腺癌中高表達，並影響乳腺癌預後。進一步機制研究表明，CUEDC2 通過調控細胞周期，使細胞具有轉化能力。本項目進一步研究CUEDC2 在乳腺癌發生、發展中的作用。主要策略是在自髮乳腺癌的Her2 等轉基因小鼠中敲除cuedc2 基因 （Her2 在25-30%的乳腺癌中過度表達或激活突變；Her2 轉基因鼠（T50 = 210 天）是近年來最常用的乳腺癌動物模型之一），闡明CUEDC2 是否是乳腺癌發生所必須的，及其作用機制。為了更好地研究CUEDC2的功能，本研究引入Tet-on四環素基因誘導表達系統來構建乳腺特異表達CUEDC2的轉基因小鼠。構建了穩定過表達CUEDC2及其突變體的MCF-10A細胞系，在細胞水平研究CUEDC2 對細胞增殖，轉化，遷移及浸潤的影響，以及CUEDC2對Her2 信號通路的影響及其生物學功能，使用穩定表達CUEDC2的乳腺癌細胞株MCF7-MSCV-GPF-CUEDC2，完成了裸鼠體內腫瘤細胞異位接種實驗，分析CUEDC2促進腫瘤形成及轉移能力。目前結果發現在分子細胞水平EGF生長因子刺激會導致CUEDC2發生磷酸化；通過細胞計數實驗和Brdu摻入實驗證明CUEDC2在MCF-10A細胞中的過表達能夠促進細胞的增殖；驗證HER2基因能夠在MCF-10A細胞中促進細胞的EMT過程，同時細胞遷移實驗和transwell實驗，也明確了HER2基因能夠促進細胞的遷移和浸潤。進一步研究發現CUEDC2在 Her2轉化的MCF10A細胞中表達上調，而且在小鼠水平檢測發現NeuT-induced小鼠乳腺腫瘤中表達也是顯著上調的。但是在動物水平實驗組中，裸鼠體內腫瘤細胞異位接種實驗表明，CUEDC2能夠促進乳腺癌細胞的生長及成瘤過程，但是初步的整體小鼠觀察實驗提示，CUEDC2轉基因並沒有增加Her2小鼠的致瘤率，也沒有縮短半數成瘤時間T50，Her2 轉基因鼠與CUEDC2敲除小鼠交配得到的小鼠，乳腺癌發生率也並無顯著差別，其中機制有待進一步深入研究。