《COX-2通過Notch介導Snail/E-cadherin信號通路的分子機制》是依託蘭州大學，由周永寧擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：COX-2通過Notch介導Snail/E-cadherin信號通路的分子機制
- 依託單位：蘭州大學
- 項目負責人：周永寧
- 項目類別：面上項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
粘附功能異常導致浸潤轉移是惡性腫瘤致死的主要原因。晚近表明，COX-2可能通過下調主要粘附分子E-cadherin表達與惡性腫瘤侵襲轉移關聯，但COX-2調控E-cadherin表達的機制尚不清楚。我們前期研究提示COX-2可能通過Notch信號通路實現對E-cadherin表達的調控。擬對胃癌組織、胃癌細胞系及裸鼠模型，採用siRNA、阻斷劑、激動劑等干預以及Western blot、實時螢光定量RT-PCR、免疫組化、侵襲轉移實驗、免疫共沉澱、染色質免疫共沉澱等技術，證實COX-2通過Notch調控E-cadherin從而介導胃癌的侵襲轉移；進一步深入探討COX-2/Notch/E-cadherin信號通路及作用機制。從而揭示COX-2在胃癌發病中的作用以及參與胃癌侵襲轉移的分子機制，為胃癌侵襲轉移的預防以及未來的靶向治療提供新的理論依據。
結題摘要
項目背景：有報導COX-2可能通過下調粘附分子E-cadherin表達與惡性腫瘤侵襲轉移關聯，但COX-2調控E-cadherin表達的機制尚不清楚。 主要研究內容：我們前期研究提示COX-2可能通過Notch通路實現對E-cadherin表達的調控。本項目擬對胃癌組織及細胞系，採用siRNA、阻斷劑、激動劑等干預，通過Western blot、定量PCR、免疫組化、侵襲轉移實驗等技術，證實COX-2通過Notch調控E-cadherin從而介導胃癌的侵襲轉移，進一步深入探討COX-2/Notch/E-cadherin信號通路及作用機制。從而揭示COX-2在胃癌發病中的作用以及參與胃癌侵襲轉移的分子機制。 實驗結果：Notch1/2/3和Jagged1在胃癌中以高表達為主；胃癌組織中Notch1表達與腫瘤浸潤深度、TNM分期呈正相關，Jagged1表達與腫瘤有無遠處轉移相關，COX-2的表達與胃癌分化程度、浸潤深度相關，其在低未分化胃癌組中的表達明顯高於高中分化組，浸潤深度越深表達量越高。在不同分化程度的腫瘤細胞中，COX-2與Notch1的表達呈現反向相關。特異性COX-2抑制劑塞來昔布能夠促進胃癌細胞中Notch1的表達，前列腺素E2能夠下調胃癌細胞中Notch1的表達。採用COX-2與Notch1的siRNA序列處理細胞後，顯示COX-2能夠促進Snail表達而Notch1則抑制Snail表達；用siRNA下調Notch1和COX-2的表達能夠抑制胃癌細胞遷移。 科學意義：胃癌中COX-2調控E-cadherin的機制可能通過Notch信號通路實現，高表達的COX-2可通過促進Notch1的活化進而上調Snail，抑制E-cadherin的轉錄和表達，參與胃癌的浸潤轉移過程。本項目首次發現存在一條新的信號通路（COX-2/Notch1/Snail/E-cadherin）並在胃癌的發生髮展中扮演著重要角色，對胃癌發生髮展分子機制的研究提供了新的理論依據，並為未來分子靶向預防和治療提供了新的思路及理論基礎。值得提及的是，實驗中我們發現COX-2對Snail的調控途徑除了Notch通路外，可能還涉及miRNA表達的變化，我們已獲得2014年國家自然科學基金的資助，藉此我們正深入探討胃癌中COX-2及miRNA之間的深層次聯繫及調控關係。
