《CMLC-McAb基因克隆及其在心肌損傷中的套用》是依託吉林大學，由李榮文擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：CMLC-McAb基因克隆及其在心肌損傷中的套用
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：李榮文
- 依託單位：吉林大學
- 批准號：39370655
- 申請代碼：H2605
- 負責人職稱：助理研究員
- 研究期限：1994-01-01 至 1996-12-31
- 支持經費：5（萬元）
項目摘要
採用雜交瘤細胞融合技術製備出8株雜交瘤細胞，選擇了分泌CMLC-MCAb的ZE9和分泌CMHC-McAb的1E12進行了細胞總RNA的提取，經反轉錄分別合成了相應的CMLC-McAb和CMHC-McAb的cDNA。實驗實合成了一對抗體通用引物。經PCR擴增後獲得兩個340bP的cDNA片段。以Puc19質粒為載體，分別構建了含有CMLC-McAb和CMHC-McAb輕鏈可變區（VL）cDNA的PMLA2和PMHA，系列，經α-互補實驗檢查，小量製備質粒DNA限制性酶切分析及重組質粒中DNA目的基因的PCR擴增字確認重組質粒中插入有目的基因，經EcoRI和PstI雙酶切後，構建了表達載體PBVLA2和pBVHA1。轉化宿主菌後進行了表達。由於表達量較低，尚需進一步構建高效表達載體。
