《CHFR在DNA損傷應答中的功能研究》是依託復旦大學，由吳家雪擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：CHFR在DNA損傷應答中的功能研究
- 依託單位：復旦大學
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：吳家雪
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
CHFR是一個抑癌基因，但對於其抑制腫瘤發生的分子機制目前還不清楚。最近申請人發現CHFR缺陷型小鼠和細胞都對離子輻射敏感。經過脈衝雷射微量照射後CHFR能快速的定位到DNA損傷位置，並很快從DNA損傷位置消失。而且CHFR作為一個泛素連線酶E3，能在體外泛素化組蛋白H2A和H2B。這些結果表明CHFR參與了DNA損傷應答這一重要的生理過程，並可能調控DNA損傷誘導的組蛋白泛素化。本課題將深入研究CHFR參與DNA損傷應答的分子機制，包括明確調控CHFR參與DNA損傷應答的信號通路，鑑定在DNA損傷位置CHFR的底物，以及分析CHFR對DNA損傷誘導的細胞周期檢查點的激活和DNA損傷修復的影響。並分析CHFR缺陷型小鼠產生的腫瘤，包括分析其染色體的數目，易位和重組，為闡明CHFR抑制腫瘤發生的分子機制提供新思路。
結題摘要
CHFR在很多腫瘤中由於高度甲基化而低表達或不表達，是一個重要的抑癌基因，但對於其抑制腫瘤發生的分子機制目前還不清楚。在本研究中,我們發現經過脈衝雷射微量照射後CHFR能快速的定位到DNA損傷位置，並很快從DNA損傷位置消失, 而其定位到DNA損傷位置依賴其PBZ結構域。PBZ結構域是一個與PAR結合的結構域，而且CHFR定位到DNA損傷位置能被PARP抑制劑抑制，但不受H2AX-MDC1-RNF8信號通路的影響，表明CHFR定位到DNA損傷位置依賴於PAR。CHFR定位到DNA損傷位置後，調控DNA損傷位置的蛋白泛素化；CHFR還與PARP1相互作用，對其進行泛素化，並促進PARP1在DNA損傷位置的降解。最後，CHFR參與了非同源末端連線修復（NHEJ）。這些結果表明，CHFR參與了DNA損傷的早期修復，是一個重要的DNA損傷修復基因。相關研究結果發表在Nucleic Acids Research (2013 Feb 1;41(3):1698-710)，課題負責人為並列第一作者(但忘記標註本項目項目號)。 通過親和純化和質譜分析，我們發現除了PARP1外，CHD1L也是CHFR的一個相互作用蛋白。與CHFR是一個抑癌基因相反的是，CHD1L是一個原癌基因，在多種腫瘤中高表達。CHFR與CHD1L相互作用，並泛素化CHD1L，從而調節CHD1L蛋白的穩定性。而這一過程依賴於PARP1對CHD1L的PAR修飾，PARP抑制劑能抑制CHFR與CHD1L的相互作用，阻滯CHD1L被CHFR泛素化和降解。此外我們還以乳腺癌為模型，分析CHFR和CHD1L在乳腺癌中表達的相關性，發現CHFR在乳腺癌中低表達，而CHD1L在乳腺癌中高表達，並且CHFR和CHD1L的表達水平呈負相關。這些研究結果為進一步研究PARP抑制劑在乳腺癌治療中的套用提供一個新的方向。相關的研究結果正在撰寫論文“CHFR regulates CHD1L stability in Breast Cancer”，計畫投遞到Cancer Research，課題負責人為最後通訊作者。
