《CD40信號複合體新組分的鑑定與功能研究》是依託中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院，由李衛華擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：CD40信號複合體新組分的鑑定與功能研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：李衛華
- 依託單位：中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
CD40屬於腫瘤壞死因子受體家族，是MAPK，NF kappa B通路，尤其是非經典NF kappaＢ 通路的重要激活子。其介導的信號通路不僅對免疫應答至關重要，而且與自身免疫性疾病，神經退行性疾病以及腫瘤等密切相關。CD40信號複合體組成及功能研究是闡明CD40引起的信號轉導通路的前提和必要條件，也是CD40信號通路研究的熱點方向。本研究前期工作套用質譜技術鑑定了CD40刺激10min形成的信號複合物新組分，其中包括1、MAPK通路中的重要激酶MKK1、MKK3、MKK4。2、PI3K 通路蛋白：p150PI3K，PLCγ；3、泛素化E2酶 NCUBE1；4：與細胞膜定位相關的蛋白質ERLIN2；5：其他蛋白激酶ROCK1，PKA等。本研究擬探討複合體新組分在CD40引起的下游通路中所起的作用以及機制，為闡明CD40信號的轉導與調控提供新的突破口。
結題摘要
細胞表面受體CD40屬於腫瘤壞死因子受體（TNFR）家族，是一種重要的免疫細胞共刺激因子受體。CD40介導的信號在免疫應答的過程中起著非常重要的作用。CD40與配體結合後，通過形成受體複合體激活下游多條信號轉導通路，主要有NFB（包括經典通路和非經典通路）, MAPK（主要是p38, JNK）和PI3K等，最終實現其生物學效應。信號複合體中的蛋白質直接參與了下游信號轉導，不同通路之間的交叉，以及信號分子之間的相互調節，信號複合體組成及功能的研究是闡明CD40引起的信號轉導通路的前提和必要條件。 本研究通過免疫共沉澱法對CD40刺激10分鐘時所形成的受體複合體進行了分離，用串聯質譜鑑定到了一些可能參與複合體功能和調節的蛋白質。其中有很多與信號轉導密切相關的分子。1、MAPK通路中的重要激酶MKK1、MKK3、MKK4。2、PI3K 通路蛋白：p150PI3K，PLC；3、泛素化E3酶NEDD4，4、泛素化E2酶NCUBE1；4、其他蛋白激酶ROCK1，PKA等。我們進一步對鑑定到這些信號複合體組分進行了驗證和功能研究。發現泛素化E3連線酶和NEDD4和激酶ROCK1與CD40具有相互作用，而其相互作用均不依賴於陪體刺激。我們套用CD40信號通路敏感的細胞系以及NEDD4敲除的B淋巴細胞對NEDD4在CD40信號通路以及其他免疫相關信號通路中的功能進行探索，發現NEDD4是CD40激活p38MAPK通路的負調節子。通過套用ROCK1的抑制劑Y27632，發現抑制ROCK1的活性可以抑制CD40引起的pJNK激活。進一步分子機制研究發現NEDD4能夠與CD40信號復和體中重要的接頭蛋白TRAF3和IKK發生相互作用並調節其泛素化修飾。 以上發現為進一步闡明CD40信號通路的調節機制提供了重要線索。
