《CD4+CXCR5+細胞在骨髓增生異常綜合徵發病機制中作用的研究》是依託天津醫科大學，由王化泉擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：CD4+CXCR5+細胞在骨髓增生異常綜合徵發病機制中作用的研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：王化泉
- 依託單位：天津醫科大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
免疫細胞異常在骨髓增生異常綜合徵（MDS）發病機制中發揮重要作用。我們既往研究發現MDS存在Th1、Th2、Treg細胞和B細胞異常。CD4+CXCR5+細胞是輔助B細胞產生抗體的重要輔助T細胞。本研究擬在前期工作的基礎上，以MDS患者和NUP98-HOXD13轉基因小鼠為研究對象，在細胞、組織和個體各個層次分析CD4+CXCR5+細胞在MDS發病機制的重要作用。流式細胞儀分析CD4+CXCR5+細胞數量及關鍵細胞表面分子的表達，PCR和WB分析分選後CD4+CXCR5+細胞關鍵轉錄因子Bcl-6等基因和蛋白的表達，ELISA分析CD4+CXCR5+細胞和B細胞混合培養後的免疫球蛋白數量,免疫組化研究小鼠脾臟淋巴濾泡結構，DNA轉染和RNAi技術分析Bcl-6表達增強和減低對B細胞調節的影響。闡明CD4+CXCR5+細胞在MDS發病機制中的作用，為MDS的靶向調節和治療奠定基礎。
結題摘要
免疫細胞異常在骨髓增生異常綜合徵（MDS）發病機制中發揮重要作用。我們既往研究發現MDS存在Th1、Th2、Treg細胞和B細胞異常。CD4+CXCR5+細胞是輔助B細胞產生抗體的重要輔助T細胞。本研究擬在前期工作的基礎上，以MDS患者和NUP98-HOXD13轉基因小鼠為研究對象，分析CD4+CXCR5+細胞在MDS發病機制的重要作用。 1、MDS組患者外周血CD4+CXCR5+細胞數量、表面受體ICOS 、CD40L和OX40表達、包漿內內產生IL-21及IL-21和Bcl-6 mRNA表達水平、輔助B細胞產生抗體的水平明顯高於正常對照組. 2、MDS組患者骨髓CD4+CXCR5+細胞數量明顯高於正常對照組，而低危和高危組MDS患者無差異。 3、MDS小鼠濾泡輔助T細胞及其表面分子表達的研究 （1）MDS小鼠骨髓中Tfh細胞數量、表面分子OX40表達水平明顯低於野生型小鼠，而ICOS、CD40L的表達無明顯差異；MDS小鼠骨髓單個核中PD-1 mRNA表達水平高於野生型小鼠骨髓單個核細胞PD-1 mRNA表達水平，ICOS、CD40L、OX40 mRNA表達水平明顯低於野生型小鼠骨髓單個核細胞PD-1 mRNA表達水平。 （2）MDS小鼠脾臟Tfh細胞表面共刺激分子ICOS、CD40L、OX40的表達均明顯低於野生型小鼠，細胞表面PD-1的表達水平明顯高於野生型小鼠，小鼠脾臟Tfh細胞數量與野生型小鼠相比數量降低，MDS小鼠脾臟細胞內ICOS、CD40L mRNA的表達明顯低於野生型小鼠，差異具有顯著性。 （3）MDS小鼠及野生型小鼠脾臟細胞免疫組化結果顯示MDS小鼠脾臟細胞表面CXCR5的表達明顯低於野生型小鼠，而PD-1的表達明顯高於野生型小鼠。 4、MDS患者外周血MDSC比例增高，並隨著疾病危險程度增加而上升。 綜上所述，我們發現MDS患者及正常人CD4+CXCR5+細胞數量、表面分子及mRNA表達水平，發現MDS患者及正常人存在的差異。同時，比較了MDS小鼠及野生型小鼠的差異，並套用免疫組化發現了MDS小鼠及野生型小鼠脾臟細胞PD-1、CXCR5表達的不同，在細胞、組織和個體各個層次分析了CD4+CXCR5+細胞在MDS發病機制的重要作用。
