簡介
CASA (Computer-aided sperm analysis) 計算機輔助精子分析
使用CASA評估精子活力
CASA分析儀能夠識別活動精子(推薦使用相差顯微鏡),最適宜套用於精子動力學的分析。很多因素都會影響到CASA分析儀的性能,如標本的製備、幀頻率、精子濃度和計數池的深度等。然而,如果操作程式得當還是可以獲得可靠和可重複的結果。在使用CASA分析儀檢測精子運動參數時,每份標本至少要分析200個活動精子的運動軌跡,這意味著需要檢測更多的精子。如果要把精子按運動方式分類,或打算在一份標本中對結果變異性做其他分析時,至少需要200個,最好是400個活動精子的運動軌跡(目前國內已有自主研發的精子分析儀,一份標本分析兩次,每次至少分析200個精子,兩次分析結果通過統計學的95%
可信區間才可以出報告)。每個標本中分析的精子數目應標準化。 CASA分析儀應當連結到那些能進行數據整合和統計學分析的計算機軟體。
使用CASA評估精子濃度
影響CASA檢測濃度的因素:(1)精子體積必須精確測量(稱重法);(2)精液要完全液化,取樣前要重新充分混勻;(3)計數板的間隙要準確、底板和蓋玻片之間的
平行度要好,並經常按質控要求定期檢查,計數板之間的一致性要達到能夠互換的要求。
CASA檢測濃度的保證:(1)CASA檢測精子濃度,每次檢測至少達到5個視野和200條以上的精子,這兩個要求要同時滿足;(2)一份標本檢測2次,總共要觀察10個以上的視野,400條以上的精子。
稀釋要求:精子濃度過高(>50百萬個/ml)可能會出現高頻度的精子碰撞,被碰撞的精子發生位移,撞擊者則可能別儀器重新識別,由此產生的誤差,使儀器檢測的結果偏高。濃度越高,這種誤差越大。所以對高精子濃度的精液應該進行稀釋。
使用CASA分析精子形態
CASA可以用來定量分析精子頭部、中段甚至主段的形態(精子尾部缺陷可以採用測量活力的方法進行更直接的評估) 碎片過多或黏稠的精液標本,為減少背景,可以洗滌精液。
CASA術語
1、 VCL=曲線速度(µm/s)。精子頭沿其實際的曲線,即在顯微鏡下見到的二維方式運動軌跡的平均速度。檢測
細胞活力。
2、 VSL=直線速度(µm/s)。根據精子頭在開始檢測時的位置與最後所處位置之間的直線運動的時間平均速度。
3、 VAP=平均路徑速度(µm/s)。精子頭沿其空間平均軌跡移動的時間平均速度。這個軌跡是根據CASA儀器中的算法對實際軌跡平整後計算出來的;這些算法因儀器不同而有所不同,故不同CASA系統的數值不能直接相比較。
4、 ALH=精子頭側擺幅度(µm)。精子頭沿其空間平均軌跡側擺的幅度。以側擺的最大值或平均數值表示。不同的CASA儀器用不同的算法計算ALH,故不同CASA系統的數值不能直接相比較。
5、 LIN=直線性。曲線軌跡的直線性。VSL/VCL。
6、 WOB=擺動性。精子頭沿其實際軌跡的空間平均路徑擺動的尺度。VAP/VCL。
7、 STR=前向性。空間平均路徑的直線性。VSL/VAP。
8、 BCF=鞭打頻率(Hz)。精子曲線軌跡越過其平均路徑軌跡的時間平均速率。
9、 MAD=平均移動角度(度)。精子頭沿其曲線軌跡瞬間轉折角度的時間平均絕對值。
其它相關
估算區域植被淨生產力的模型(CASA)
(Carnegie-Ames-StanfordApproach)是1993年由Potter等發明的用於估算區域植被淨生產力的模型,是
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NPP(x,t)=PAR(x,t) × FPAR(x,t) ×ε(x,t)
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