《Breg在EV71年齡依賴性致病中的作用及機制研究》是依託中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院，由趙忠鵬擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：Breg在EV71年齡依賴性致病中的作用及機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：趙忠鵬
- 依託單位：中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
手足口病（EV71感染）呈年齡依賴性，但其機制不清。現有證據表明EV71引起了重症病人免疫過激反應，與機體免疫應答失調密切相關。Treg在病毒性感染疾病的免疫調控中起著關鍵作用，而Treg細胞功能與活性又是受其上層調節細胞Breg所調控，後者與嬰幼兒對傳染病的易感性相關。因此，本研究擬利用本實驗室所建立的EV71年齡依賴性致病小鼠為模型，運用免疫學研究技術，通過對EV71感染後不同時間點的不同日齡乳鼠與成年鼠的Breg、NK、DC、CD4+T、CD8+T、IFN-γ、IL-6、病理切片進行比較分析，探索造成EV71感染年齡依賴性的細胞與分子機制，並最後在動物模型和細胞模型上進行功能驗證，旨在闡明Breg在EV71年齡依賴性致病中的作用及機制。本研究將為嬰幼兒手足口病的防治奠定一定的理論基礎和提供潛在免疫干預靶標，而且將部分揭示免疫調控影響傳染性疾病易感性的本質原因。
結題摘要
近年來，EV71型手足口病在亞太地區呈現爆發流行態勢，由於迄今仍沒有安全、有效的疫苗和高效、低毒的藥物來防治手足口病，手足口病的爆發流行短期內無法得到有效扼制。對於疫苗研發和藥物研製至關重要的手足口病病原、免疫、致病機制基礎研究仍然薄弱，大部份仍屬空白，亟待加強。 本課題立足國內手足口病流行病學實際，站在國內外抗感染免疫前沿，探討手足口病免疫致病機制的根本問題，獲得了手足口病臨床病人和動物模型的完整資料，找到了致病的關鍵的免疫細胞和分子，得到了潛在的免疫干預靶標，取得了實質性的進展，較為圓滿地完成了課題的預期目標和任務。 利用病毒學、分子生物學方法從手足口病患兒臨床樣品中分離獲得了大量的EV71和柯薩奇病毒A16（CA16）毒株，為疫苗株篩選和動物模型建立提供了豐富的物質材料； 利用病毒馴化原理，將對乳鼠致病力低的毒株通過鼠源細胞、低日齡乳鼠逐步馴化，成功獲得對乳鼠高致病的毒株，成功感染致死14日齡乳鼠並獲得了嗜肌肉型、嗜神經型的毒株，為動物模型的建立提供了堅實的基礎； 利用所分離馴化的毒株攻擊不同日齡乳鼠，通過觀察死亡率、臨床疾病得分、體重變化，成功建立手足口病動物模型； 在建立的手足口病動物模型上，利用流式細胞術分析了Breg、Treg、NK、DC、T、B等免疫細胞的變化規律；利用CBA技術分析了IL-6、TNF-α、CCLx、CSF等炎症相關免疫、趨化、生長因子的變化規律；利用ELISA手段分析了去甲腎上腺素和皮質醇等內分泌激素的變化規律；利用病理學方法分析了不同組織器官的病理變化規律； 利用以上技術和方法，對手足口病患兒臨床樣品，尤其是血清、血漿、腦脊液樣本分析了IL-6、TNF-α、CCLx、CSF等炎症相關免疫、趨化、生長因子的變化規律；對血細胞分析了Breg、Treg等免疫細胞的變化規律；並對手足口病重症患兒病例的腦脊液塗片和血細胞流式細胞術結果進行了統計學分析；通過比較分析，找到了動物模型和臨床樣本變化規律一致的免疫細胞和分子；為進一步進行轉化醫學研究奠定了基礎； 對動物模型和臨床樣本變化規律一致的免疫細胞和分子在動物模型上進行了免疫干預研究，並在基因敲除小鼠上進行了功能驗證，獲得了手足口病免疫致病關鍵的免疫細胞和分子，正在進行免疫信號級聯通路機制研究，真正闡明免疫致病的細胞和分子機制，提供多個潛在的免疫干預靶標.
