《BCR特異性及信號強度在B10細胞發育中的作用及機制研究》是依託中國人民解放軍第四軍醫大學，由李巍擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：BCR特異性及信號強度在B10細胞發育中的作用及機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：李巍
- 依託單位：中國人民解放軍第四軍醫大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
近年來調節性B細胞日益引起人們的關注，特別是最近研究揭示了被稱為B10細胞的CD5+CD1dhi的脾B細胞亞群在T細胞應答中發揮負向調節作用，首次明確了生理條件下調節性B細胞的存在和表型。然而B10細胞產生和活化的機制還遠未闡明。.B細胞抗原受體(BCR)是B細胞發育過程中的核心分子，以往研究提示BCR信號強度對B10細胞發育具有重要影響。我們已建立角蛋白特異性BCR轉基因小鼠並對其B細胞發育進行了系統分析，最近發現其脾臟CD5+CD1dhiB細胞數明顯增多，提示BCR特異性對B10細胞發育可能具有影響。本研究擬利用不同膜表面BCR密度轉基因小鼠，進行體內和體外實驗進一步分析BCR特異性和信號強度在B10細胞發育中的作用，並深入分析B10細胞的可變區基因取用規律、抗原特異性等特點。本研究有望闡明BCR信號途徑在B10細胞發育中的作用及其機制，為下一步有針對性地調控奠定基礎。
結題摘要
免疫應答的調控一直是免疫學領域的根本問題，負向免疫調控近年來尤其受到重視。調節性B細胞(regulatory B cells, Breg)是具有重要負向免疫調節功能的B細胞亞群，其中小鼠脾臟中表型為CD5+CD1dhighCD19+、分泌IL-10的Breg被稱為B10細胞，在自身免疫、變態反應、腫瘤免疫、抗感染免疫中發揮重要作用。然而，B10發育和分化的機制尚不明確。BCR是B細胞發育過程中的核心分子，其特異性和信號強度對B細胞的發育具有關鍵性的作用，但BCR特異性和親和力在B10細胞發育中的作用尚未完全闡明。我們利用在前期工作中建立的2系具有不同BCR表面密度的能夠識別自身抗原Actin的BCR轉基因小鼠TgVH3B4，分析了BCR特異性和信號強度對B10細胞發育的影響。我們首先採用ELISPOT方法分析了B10細胞的抗原識別譜，發現野生小鼠脾臟中CD5+CD1dhigh B細胞主要識別自身抗原而不是外來抗原；之後發現TgVH3B4小鼠脾臟CD5+CD1dhigh B細胞比例明顯升高，體外培養中LPS+PIM 5 h作用下，脾臟和腹腔IL-10+ B細胞比例也明顯升高；轉基因小鼠IgMa+ B細胞、Actin+ B細胞中IL-10陽性細胞數明顯高於IgMa- B細胞和Actin-B細胞；皮下注射Actin進一步誘導TgVH3B4小鼠脾臟CD5+CD1dhigh B細胞的擴增。上述結果提示BCR特異性在B10細胞發育中發揮重要作用。BCR密度較高的39系TgVH3B4小鼠的脾臟CD5+CD1dhigh B細胞數高於BCR密度較低的11系小鼠，體外培養中39系小鼠表達IL-10的細胞數更多；野生小鼠B細胞體外培養中，膜結合型抗IgM抗體比可溶型抗IgM抗體刺激產生更多的B10，其CD5分子表達水平也更高。這些結果提示BCR信號強度也對B10細胞發育產生影響。本研究首次明確了較強的BCR信號有利於B10細胞的發育，識別自身抗原是B10細胞BCR的主要抗原特異性並且對B10細胞具有陽性選擇作用。本研究從BCR信號角度探索了B10產生的機制，為將來可能的調控奠定了基礎。
