BCA(二辛可酸)

BCA，2,2-聯喹啉-4,4-二甲酸二鈉，化學品。淡黃色粉末、有吸濕性，溶解於水或者乙醇。

基本介紹

• 中文名：BCA
• 化學式：C20H10N2Na2O4 · xH2O
• 分子量：388.28
• CAS登錄號：979-88-4

化學性質

淡黃色粉末、有吸濕性，溶解於水或者乙醇。

套用

BCA法是近來廣為套用的蛋白定量方法。其原理與Lowery法蛋白定量相似，即在鹼性環境下蛋白質與Cu2+絡合併將Cu2+還原成Cu1+。BCA與Cu1+結合形成穩定的紫藍色複合物，在562 nM處有高的光吸收值並與蛋白質濃度成正比，據此可測定蛋白質濃度。與Lowery法相比，BCA蛋白測定方法靈敏度高，操作簡單，試劑及其形成的顏色複合物穩定性俱佳，並且受干擾物質影響小。與Bradford法相比，BCA法的顯著優點是不受去垢劑的影響。

器材

1. 7220型分光光度計

2. 比色杯

3. 恆溫水浴箱

4. 中試管7支

5. 槍式移液管

試劑

1. 試劑A： 1%BCA二鈉鹽 2%無水碳酸鈉 0.16%酒石酸鈉 0.4%氫氧化鈉 0.95%碳酸氫鈉混合調PH值至11.25。

2. 試劑B：4%硫酸銅。

3. CA工作液：試劑A?100ml?+?試劑B?2ml混合。

4. 蛋白質標準液：用結晶牛血清白蛋白根據其純度用生理鹽水配製成1.5mg/ml的蛋白質標準液。（純度可經凱氏定氮法測定蛋白質含量而確定）

5. 待測樣品：用雙縮脲測定法的樣品稀釋而成。