《BATF介導PD-1負性調控活動性結核患者T細胞功能的機制研究》是依託復旦大學，由高岩擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：BATF介導PD-1負性調控活動性結核患者T細胞功能的機制研究
- 依託單位：復旦大學
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：高岩
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
研究已證實，免疫抑制因素在活動性結核的發病中起著重要作用。我們前期研究發現，PD-1可能作為抑制性因素參與活動性結核的發病。最近在HIV感染的研究中證實，PD-1可以特異性上調AP-1轉錄因子超家族成員BATF的表達，從而降低T細胞活性。我們同樣也發現，活動性結核患者BATF表達升高，且與PD-1相關。因此，推測PD-1可能通過BATF介導其負性調控抗結核免疫反應。本課題將入選不同結核感染狀態的人群，包括活動性結核患者、潛伏結核感染者及健康對照者，利用細胞染色和流式細胞術，確定PD-1、BATF的表達及其與結核特異性T細胞功能耗竭的關係；然後通過體外實驗體系激活或阻斷PD-1通路，了解其對結核特異性T細胞表達BATF的影響；最後利用siRNA技術上調或沉默BATF基因表達，明確BATF對結核特異性T細胞功能的影響，從而為開發以BATF分子為靶標的新型結核免疫治療提供理論基礎。
結題摘要
研究目的：研究BATF在活動性結核患者中調控結核免疫的作用機制，為開發抗結核免疫治療提供理論依據。 研究方法：入選三組不同結核感染狀態人群：活動性肺結核患者59例（ATB），潛伏性結核感染者16例（LTBI）和健康對照者22例（HC）。檢測三組人群外周血中BATF在CD4+ T細胞和CD8+ T細胞的表達情況，以結核特異性抗原PPD刺激，特異性抗體antiPD-1、antiPD-L1、antiPD-L2阻斷PD-1/PDLs通路，PD-L1重組蛋白激活PD-1/PDLs通路不同的處理方法，以及RNA干擾技術下調PBMC的BATF的表達。套用流式細胞術和螢光定量PCR方法檢測ATB患者外周血T細胞BATF表達的變化和細胞分泌IL-2和IFN-γ水平的變化以及對CD4+ T細胞體外增殖能力的影響。 研究結果：ATB組外周血表達BATF的T細胞占CD4+ 、CD8+ T細胞的百分比顯著高於LTBI組（P=0.0003，P=0.0003）和HC組（P<0.0001，P=0.0003）；ATB患者中，結核特異性抗原PPD刺激組表達BATF的CD4+ T細胞百分比中位數（2.81% vs 0.75%，P=0.048）以及CD8+ T細胞百分比中位數（1.48% vs 0.76%，P=0.039）比未刺激組明顯增高。阻斷PD-1與其配體結合，表達BATF的CD4+ T細胞百分比無明顯變化，但表達BATF的CD8+ T細胞百分比中位數在加入PD-1阻斷劑時有明顯下降（0.85% vs 1.48%，P=0.014）。進一步分析發現，阻斷PD-1的配體PD-L1/L2時表達BATF的CD4+ T細胞百分比明顯降低（0.89% vs 2.81%，P=0.023），在CD8+ T細胞得到同樣的結果（1.01% vs 1.48%，P=0.026）。通過RNA干擾技術下調BATF的PBMCs中發現，細胞分泌細胞因子IL-2（2.2 vs 1，P=0.0485）和IFN-γ（4.4 vs 1，P=0.0473）的能力（mRNA水平）明顯升高。且BATF下調的CD4+ T細胞體外增殖能力明顯升高（P=0.0041）。 結論：BATF介導PD-1負性調控活動性結核患者T細胞功能，通過下調BATF的表達可以部分恢復細胞分泌細胞因子IL-2和IFN-γ的能力以及T細胞增殖的能力。
