《BAG6複合體在DNA損傷反應過程中的功能研究》是依託中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院，由汪宜擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：BAG6複合體在DNA損傷反應過程中的功能研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：汪宜
- 依託單位：中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
DNA損傷反應是哺乳動物細胞維持基因組的穩定性，保持細胞存活和抑制腫瘤的關鍵通路，其發生髮展涉及到大規模蛋白轉運、細胞內重定位、DNA反應/修復複合物重構及蛋白重摺疊，過程極為複雜，其機制仍不明了。BAG6蛋白既具有與泛素系統相互作用的UBL結構域又具有分子伴侶系統BAG結構域，因而具有協助蛋白轉運、摺疊及對此過程監控的能力。我們前期研究發現BAG6與GET4和UBL4A所形成的BAG6複合體可調控DNA損傷調節因子BRCA1向DNA損傷位點的募集，提示其在DNA損傷修復中的重要作用。本課題擬在此基礎上進一步研究其在DNA損傷反應中的功能，利用蛋白質組學定量平台，篩選其在該過程中的底物靶點蛋白。獲得一批相關調控分子，形成由BAG6複合體發散開的DNA損傷反應調控網路。為全面了解DNA損傷反應體系中的精確控制、各層面蛋白分子調控機制及其與分子伴侶系統、泛素化系統的關聯提供全新的理論依據。
結題摘要
Bcl2相關的永生基因（BAG）家族蛋白是含有BAG結構域的蛋白質，並在真核生物中進化保守。BAG家族蛋白在多種細胞過程中起關鍵作用，例如細胞存活，增殖，遷移，凋亡，應激反應和神經分化。BAG結構域為BAG家族蛋白的基本功能結構域，我們通過對BAG家族蛋白成員及BAG結構域間的相互作用蛋白進行分析，以探明不同BAG結構域相互作用蛋白的異同點，進而研究BAG家族蛋白多樣性生物功能的分子機制。我們構建了p-GEX-4T2-BDs重組子並轉化E.coli BL21（DE3）經IPTG誘導表達GST-BDs融合蛋白並純化。採用GST pulldown技術聯合高效液相色譜串聯質譜(LC-MS/MS)的策略對BAG結構域相互作用蛋白進行定性定量分析。我們發現BAG家族蛋白不同成員的BAG結構域所介導的蛋白-蛋白相互作用既有共性又有特異性，BAG家族蛋白通過BAG結構域介導多種蛋白相互作用並參與細胞內多條重要的信號通路來調控細胞內蛋白質穩態、糖代謝、免疫反應、應激反應、細胞周期等過程。我們的研究成果為理解BAG結構域在介導BAG蛋白質的不同細胞功能中的作用提供了借鑑與參考。
