《AP-2B/hTERT通路在肺癌發生髮展中的作用機理及臨床意義》是依託中山大學，由鄧務國擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：AP-2B/hTERT通路在肺癌發生髮展中的作用機理及臨床意義
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：鄧務國
- 依託單位：中山大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
hTERT高表達在肺癌發生髮展過程中起重要作用。我們前期研究發現：AP-2B能特異性地與肺癌細胞中hTERT基因的啟動子結合，並激活其轉錄活性。但這一新的AP-2B/hTER通路在肺癌發生髮展過程中是否起作用及其機理，目前尚不明確。本項目擬採用免疫印跡、免疫組化、組織晶片和qRT-PCR 等方法進一步研究AP-2B/hTERT通路在人肺癌組織中是否存在，並結合臨床資料來分析AP-2B 和 hTERT 表達與肺癌發生髮展的相關性, 確定AP-2B在肺癌診斷、預測預後復發和治療靶點上的價值。另外，我們還將用hTERT或AP-2B穩定表達、或用shRNA技術敲低AP-2B表達後的人肺癌細胞系以及它們的動物模型，來研究AP-2B/hTERT通路的生物學功能以及它在調節肺癌發生髮展過程中的作用和機理，旨在確立AP-2B作為新型的肺癌分子標記和治療靶點提供更充分的科學依據。
結題摘要
hTERT（人類端粒酶逆轉錄酶）是端粒酶的催化亞單位和限速酶, 被認為是腫瘤發生的風向指標。然而，hTERT 在正常細胞中如何失活而在腫瘤發生髮展演變過程中又是如何被激活的機制，尚不明確。前期我們用“生物素-鏈霉親和素”垂釣法和蛋白質組學方法在人肺癌細胞中垂釣出五個能特異性結合到hTERT 啟動子上的蛋白因子，並證實其中之一是AP-2β 。AP-2家族中AP-2α和AP-2γ具有控制許多腫瘤相關基因表達的能力。然而，AP-2β在調節癌症相關基因表達和控制腫瘤進展過程中所扮演的功能尚不明確。AP-2β能結合到肺癌細胞中hTERT啟動子上，並調控hTERT基因的轉錄。因此，我們推測AP-2β/hTERT 通路在調節肺癌發生髮展中起著重要的作用。 本項目中，利用腫瘤組織晶片，我們檢測了AP-2β在人肺癌組織中的表達水平，並結合臨床資料分析了AP-2β 和hTERT 表達與肺癌病理因素的相關性。結果發現，高水平表達AP-2β和hTERT的患者具有較短的生存期，它們的表達與肺癌TNM分期密切相關，分期越高，表達越高。提示AP-2β/hTERT通路在肺癌進展中起重要作用, 是潛在的肺癌標誌物。另外在肺癌細胞中，我們發現過表達AP-2β激活hTERT啟動子轉錄活性，上調端粒酶活性，穩定端粒長度，促進肺癌細胞的生長。敲低AP-2β表達則抑制肺癌細胞hTERT啟動子活性和端粒酶活性，並抑制肺癌細胞的生長和克隆形成，誘導肺癌細胞凋亡。動物模型中，敲低AP-2β表達，可抑制裸鼠肺癌皮下種植瘤的生長。另外，還發現，敲低AP-2β可抑制Bcl-2表達，上調BAX表達，促進細胞色素C的釋放，從而激活caspase3/9介導的細胞凋亡信號通路。同時，敲低AP-2β表達，可抑制磷酸化p38/ERK介導的細胞存活信號通路。並且，在肺癌細胞和裸鼠肺癌皮下種植瘤中，敲低AP-2β表達，均可抑制VEGF表達，上調PEDF表達，並降低癌瘤組織的微血管密度(MVD)，提示AP-2β具有促進肺癌血管增生的功能。 綜上所述，AP-2β在調控肺癌發生髮展過程中發揮重要的作用。其通過調控hTERT表達以及與細胞存活、凋亡和血管增生相關的信號通路，進而影響肺癌細胞的增殖和腫瘤生長。我們的研究為確立AP-2β/hTERT通路作為肺癌治療的新靶點提供了充分的科學依據和實驗基礎。
