《ADAMTS-7在鼓室硬化發生中的作用》是依託山東大學，由白曉卉擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：ADAMTS-7在鼓室硬化發生中的作用
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：白曉卉
- 依託單位：山東大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
鼓室硬化是臨床上引起傳導性耳聾的常見原因之一，組織學上表現為中耳結締組織發生透明變性、鈣質沉著、形成軟骨樣或骨樣組織，然而鼓室硬化發生的具體分子生物學機制還不清楚。ADAMTS-7是一種新的金屬蛋白酶，申請者發現ADAMTS-7顯著抑制軟骨形成和軟骨成骨，降低與鼓室硬化發生密切相關的Col II蛋白的表達，很可能參與鼓室硬化的發生；國內外文獻報導和我們前期的預實驗結果也支持ADAMTS-7影響鼓室硬化發生的構想。為揭示ADAMTS-7在鼓室硬化發生中的作用，本研究擬以鼓室硬化動物模型為研究對象，檢測病變中ADAMTS-7的表達情況；利用腺病毒載體和轉基因鼠造模，分析其在鼓室硬化發病中的作用；最後探究ADAMTS-7影響鼓室硬化發生的作用機制。相信本課題的研究成果，對於解釋鼓室硬化發生的分子生物學機制具有重要的理論價值，同時對於鼓室硬化的預防、診斷、治療及預後也具有實際的臨床指導意義。
結題摘要
鼓室硬化是臨床上引起傳導性耳聾的常見原因之一，組織學上表現為中耳結締組織發生透明變性、鈣質沉著、形成軟骨樣或骨樣組織，然而鼓室硬化發生的具體分子生物學機制還不清楚。本課題組重點分析了ADAMTS-7（含I型血小板結合蛋白基序的解聚蛋白樣金屬蛋白酶-7）、MMP-9（基質金屬蛋白酶-9）以及TGF-β1（轉化生長因子β1）在鼓室硬化發生中的作用機制。首先，我們分別利用豚鼠和大鼠通過鼓室內注射3型肺炎鏈球菌，構建鼓室硬化的動物模型，ABR檢測實驗動物的聽功能，鼓室黏膜組織行HE染色和Von Kossa染色顯示造模6周后中耳黏膜組織內均可見明顯的鈣質沉積，鼓室硬化動物造模成功。繼而免疫組織化學染色檢測鼓室黏膜中ADAMTS-7表達情況，發現正常對照組中耳黏膜組織上皮下結締組織中未見明顯陽性表達顆粒，僅在上皮下細胞及細胞外基質見少量ADAMTS-7蛋白陽性表達；ADAMTS-7在實驗組豚鼠中中耳黏膜組織中均有明顯表達，且均主要表達於上皮下細胞及細胞外基質，揭示ADAMTS-7在實驗性鼓室硬化中耳黏膜組織中的表達顯著增加，參與鼓室硬化的形成。Western blot 法和免疫組化檢測鼓室硬化形成過程中不同時間點TGFβ1和MMP-9蛋白表達的動態變化趨勢：TGFβ1 蛋白在正常對照組中的表達極少，各實驗組中TGFβ1蛋白表達均明顯增高並呈遞增趨勢，與正常對照組TGFβ1 蛋白的表達量相比較，有顯著性差異且差異有統計學意義（P＜0.05）; MMP-9蛋白在正常對照組中只有少量表達，而在各實驗組中均有明顯表達，且分別與正常對照組比較，有顯著性差異且差異有統計學意義（P＜0.05）；MMP-9蛋白的表達隨鼓室硬化發展呈先增加後相對減少的趨勢，在第四周末表達量達最高，隨後表達相對減少。研究結果顯示，ADAMTS-7、MMP-9和TGF-β1均參與鼓室硬化的發生，並對鼓室硬化有重要的調控作用。進而，我們利用卡托普利與氯沙坦兩藥合用後檢測實驗動物的聽力情況，ABR結果顯示兩藥合用後實驗動物聽力顯著提高，兩藥合用對鼓室硬化的豚鼠有預防性治療作用，其機制可能與降低TGF-β1的含量有關。本課題的研究成果，對於解釋鼓室硬化發生的分子生物學機制具有重要的理論價值，同時對於鼓室硬化的預防、診斷、治療及預後也具有實際的臨床指導意義。
