ABIN1對阿片依賴及信號轉導的作用機制研究

《ABIN1對阿片依賴及信號轉導的作用機制研究》是依託中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院，由周培嵐擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：ABIN1對阿片依賴及信號轉導的作用機制研究
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：周培嵐
• 依託單位：中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院

中文摘要

本實驗室以μ阿片受體C端（MOR-C）為誘餌篩選嗎啡依賴大鼠腦cDNA文庫，得到蛋白ABIN1。本研究將確定ABIN1在神經系統的分布；嗎啡依賴時各神經核團中ABIN1的表達；ABIN1對阿片依賴影響的細胞生物學機制。明確ABIN1在阿片依賴中的作用，期望發現新的脫毒防復吸藥物治療靶點。

結題摘要

本項目在動物水平及細胞水平，研究ABIN1在神經系統的分布及其調節阿片依賴的細胞生物學機制。 本課題研究過程中，成功製備了針對人源、鼠源的ABIN1特異性抗體，證明了ABIN1在中樞神經系統有廣泛分布，在大鼠軀體依賴模型，連續遞增給予嗎啡6天時，ABIN1的mRNA和蛋白前皮層較對照組沒有明顯變化，在納洛酮催促戒斷後，ABIN1出現明顯上調。在小鼠軀體依賴納洛酮催促戒斷模型，前皮層、海馬和紋狀體的ABIN1在依賴和戒斷狀態皆出現明顯上調。大鼠連續遞增給予嗎啡30天，給藥第14天時，在海馬、紋狀體、伏隔核和皮層的ABIN1即開始增加，在自然戒斷1、7天達到最高，隨著戒斷時間的延長，ABIN1又恢復到對照組水平。原代培養的前皮層神經元、小膠質細胞在嗎啡慢性處理48小時後ABIN1在mRNA水平也表現上調，戒斷後有所下降，但仍然高於對照組。這說明在原代細胞及整體動物水平ABIN1與阿片依賴有密切關係，並有可能影響受體功能及信號後轉導通路。 為了進一步研究ABIN1對μ阿片受體（MOR）功能的影響，首先建立了穩定表達ABIN1和MOR的CHO細胞株（CHO-MOR-ABIN1），流式細胞術結果表明ABIN1對細胞周期和細胞凋亡沒有明顯影響，受體配體結合實驗表明ABIN1對MOR受體配體結合沒有明顯影響，[35S]GTPγS實驗表明ABIN1明顯抑制受體激動活性，ABIN1能夠明顯抑制激動劑作用後MOR的磷酸化及MOR的內吞。ABIN1過表達後，DAMGO對forskolin刺激的cAMP升高的抑制作用明顯減弱；阿片慢性作用後，納洛酮誘發的Ca2+超射在CHO-MOR-ABIN1較CHO-MOR細胞明顯減弱；DAMGO作用後下游信號分子pERK水平在CHO-MOR-ABIN1細胞明顯下調。這提示ABIN1是在阿片受體激動後的信號傳遞過程的另一重要調節因子，在國內外我們課題組首次提出這一觀點。基於本項目研究，投出SCI論文1篇，國核心心期刊發表論文3篇，培養碩士研究生2名。