293細胞是人腎上皮細胞系,有多種衍生株,比如HEK293,293T/17等,來源都是人胚胎腎細胞,其極少表達細胞外配體所需的內生受體,且比較容易轉染,是一個很常用的表達研究外源基因的細胞株。
293T細胞由293細胞通過基因技術派生出的細胞系,是經過腺病毒E1A基因的轉染,能表達SV40大T抗原,含有SV40複製起始點與啟動子區。許多真核表達載體如pcDNA3.1中含有SV40病毒的複製起始位點,可以在表達SV40病毒T抗原的細胞系中複製,從而提高外源基因的表達水平。因此293T細胞廣泛套用於病毒包裝。用磷酸鈣轉染效率可高達50%。蛋白表達水平高,轉染後2-3天用鹼性磷酸酶分析可較容易地檢測到表達的蛋白。瞬時轉染293T細胞是過表達蛋白並獲得細胞內及細胞外(分泌的或膜)蛋白的便捷方式。
基本介紹
- 中文名:293細胞
- 外文名:293 cellline
- 種屬:人
- 形態特點:上皮細胞
- 產物或抗原:大T抗原
細胞名稱
形態特點
細胞名稱 | 293 和 293T |
種屬 | 人 |
組織來源 | |
形態特點 | 上皮細胞 |
致瘤性 | + |
產物或抗原 | 大T抗原 |
染色體核型 | 亞三倍體人細胞系。染色體眾數為64,30%的細胞有64 條染色體。4.2%的細胞染色體數目更多。多數細胞der⑴t(1;15) (q42;q13),der⒆t(3;19) (q12;q13),der⑿t(8;12) (q22;p13),還有四條標記染色體,有的細胞另有5條標記染色體。der⑴與M8 (or Xq+)常常成對出現。N17 與 N22各有四條。值得注意的是多數細胞有三條X染色體,兩條Xq+,一條Xp+。 |
生長特性 | 粘附 |
文獻評價 | 293細胞系是原代人胚腎細胞轉染5型腺病毒(Ad 5) DNA的永生化細胞。[RF32725] 表達轉染的腺病毒5的基因。[RF32725] 早期報導認為此細胞含有Ad 5基因組左端和右端[RF32764],現已清楚僅含有左端序列。[RF50113] 此細胞系人腺病毒滴度高。 室溫不貼壁,37℃幾日後重新貼壁。 表達由整合素beta-1 亞基與玻基結合素受體 alpha-v 亞基組成的玻基結合素細胞表面受體. [RF33793] The Ad5 insert was cloned and sequenced,and it was determined that a colinear seqment from nts 1 to 4344 is integrated into chromosome 19 (19q13.2). |
傳代 | 293:棄培養基,含0.25% 胰酶,0.03% EDTA 消化液洗滌,棄去,加1-2ml消化液室溫或37℃消化。 加入新鮮培養基,吸出,分到新培養皿中。一傳二至一傳四。 293T:生長快,通常倍增時間不到一天。每3~4 天1:10至1:20稀釋,5% CO2條件下培養。細胞貼壁疏鬆,可只用EDTA消化,不要用胰蛋白酶過度消化。 |
培養基更換 | 每2-3天一次 |
凍存液 | 95%培養基;5%,DMSO;culture medium 95%; DMSO,5%;50%培養液,10%DMSO, 40%血清。 |
培養條件 | ATCC培養基:90%的MEM Eagle,加入2mM L-谷氨醯胺,1.5g/L碳酸氫鈉,0.1 mM必需胺基酸,1.0 mM 丙酮酸鈉;10%加熱滅活的馬血清 37℃培養 |