高產L-<+>-乳酸植物乳桿菌工程菌的構建與套用

內容簡介

《高產L--乳酸植物乳桿菌工程菌的構建與套用》從2003年發酵生產的保存良好、風味正常的酸白菜中，進行乳酸菌分離和鑑定。以鑑定後的Lactobacillus plantarum為出發菌株，經沒有正選擇標記的基因敲除方法，使植物乳桿菌的D-乳酸脫氫酶基因失活，建立了工程菌。工程菌的L-乳酸脫氫酶活力占總乳酸脫氫酶活力的比例提高92.5%，L-乳酸的比例提高到75.7%。對工程菌的培養基進行最佳化，15 L發酵罐中試發酵，得72 h最高產酸量31.1g/L，產酸率比最佳化前提高了40.1%。套用於發酵黃瓜，使L-乳酸的比例提高了14.8%。

圖書目錄

1 緒論

1.1 乳酸的理化性質

1.2 L-（+）-乳酸及其套用

1.3 L-乳酸生產的研究

1.4 發酵法生產L-乳酸的研究

1.5 植物乳桿菌的作用與套用

2 乳酸菌的分離和初步鑑定

2.1 乳酸菌的分離純化

2.2 形態學鑑定

2.3 乳酸菌的生化鑑定

2.4 LactobacillusplantarumHF1生長產酸特性的研究

3 產高比例L-（+）-乳酸植物乳桿菌工程菌的構建

3.1 乳酸脫氫酶的催化反應機理

3.2 乳酸脫氫酶分子生物學研究

3.3 基因敲除的原理和在微生物育種上的套用

3.4 L-（+）-乳酸高產植物乳桿菌工程菌的構建

3.5 工程菌表達特性的研究

4 工程菌產乳酸發酵條件的最佳化

4.1 L.plantarumHF1.1培養基的最佳化

4.2 發酵條件的最佳化

4.3 分批中試發酵的研究

4.4 補料發酵的研究

5 工程菌用於發酵黃瓜的研究

5.1 HF3和HF5生長曲線的研究

5.2 HF3和HF5最適生長溫度的研究

5.3 菌種耐鹽試驗

5.4 混合菌種發酵試驗

5.5 工程菌與野生菌對比試驗

5.6 黃瓜中試發酵試驗

6 工程菌構建與套用的探討

6.1 發酵蔬菜中乳酸菌的分離和鑑定

6.2 植物乳桿菌HF1和HF1.1乳酸脫氫酶的測定

6.3 植物乳桿菌HF1和HF1.1乳酸旋光性的測定方法

6.4 基因敲除法建立植物乳桿菌工程菌的可行性探討

6.5 敲除載體的構建

6.6 轉化子的篩選和鑑定

6.7 工程菌表達的特點

6.8 工程菌發酵條件的最佳化

6.9 多菌株聯合發酵生產乳酸黃瓜

參考文獻

附錄

附錄Ⅰ 培養基

附錄Ⅱ 試驗菌株

附錄Ⅲ 儀器、設備和試劑

附錄Ⅳ 試劑配製

高產L-<+>-乳酸植物乳桿菌工程菌的構建與套用

基本介紹

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