《食品安全國家標準食品中偶氮甲醯胺的測定》是根據《中華人民共和國食品安全法》規定，經食品安全國家標準審評審員會審查通過發布的食品安全國家標準。由國家衛生健康委、國家市場監管總局於2021年9月7日發布。
基本介紹
- 中文名：食品安全國家標準食品中偶氮甲醯胺的測定
- 發布機關：國家衛生健康委 國家市場監管總局
- 發布日期：2021年9月7日
- 標準編碼：GB 5009.283-2021
發布信息,標準全文,
發布信息
關於發布《食品安全國家標準 預包裝食品中致病菌限量》（GB 29921-2021）等17項食品安全國家標準和1項修改單的公告
2021年 第8號
根據《中華人民共和國食品安全法》規定，經食品安全國家標準審評審員會審查通過，現發布《食品安全國家標準 預包裝食品中致病菌限量》（GB 29921-2021）等17項食品安全國家標準和1項修改單。其編號和名稱如下：
GB 5009.283-2021 食品安全國家標準 食品中偶氮甲醯胺的測定
以上標準文本可在食品安全國家標準數據檢索平台（詳見參考連結）查閱下載。
國家衛生健康委 國家市場監管總局
2021年9月7日
標準全文
食品安全國家標準食品中偶氮甲醯胺的測定
1 範圍
本標準規定了食品中偶氮甲醯胺的液相色譜測定方法。
本標準適用於小麥粉中偶氮甲醯胺的測定。
2 原理
試樣用 N,N-二甲基甲醯胺溶液提取,離心,用三苯基膦衍生,衍生液經液相色譜測定,外標法定量。
3 試劑和材料
警示———三苯基膦和 N,N-二甲基甲醯胺操作時應避免接觸皮膚和眼睛,在通風環境中操作。
除非另有說明,本方法所有試劑均為分析純,水為 GB/T6682規定的一級水。
3.1 試劑
3.1.1 甲醇(CH4O):色譜純。
3.1.2 N,N-二甲基甲醯胺(C3H7NO)。
3.1.3 無水硫酸鎂(MgSO4)。
3.1.4 三苯基膦(C18H15P)。
3.2 試劑配製
三苯基膦衍生溶液:準確稱取三苯基膦100mg,用 N,N-二甲基甲醯胺溶解並定容至10mL,配製成濃度為10.
0mg/mL的衍生溶液,存放於避光處備用。臨用前配製。
3.3 標準品偶氮甲醯胺標準品(C2H4N4O2,CAS:123-77-3),純度＞97%。或經國家認證並授予標準物質證書的標準品。
3.4 標準溶液配製
3.4.1 標準儲備溶液:準確稱取偶氮甲醯胺標準品50mg(精確至0.1mg),用 N,N-二甲基甲醯胺溶解並定容至500mL,混勻,配製成濃度為100μg/mL 的標準儲備溶液,將溶液轉移至棕色玻璃容器中,-20 ℃下避光保存備用,有效期20d。
3.4.2 空白基質提取溶液:使用空白小麥粉按照5.2方法進行試樣處理,得到空白基質提取溶液。空白小麥粉中偶氮甲醯胺的含量應低於本方法檢出限。GB5009.283—20212
3.4.3 標準系列工作溶液:分別吸取 100μg/mL 的標準儲 備 液 50.0μL、100μL、200μL、500μL、1000μL於一 組 10 mL 容 量 瓶 中,用 空 白 基 質 提 取 溶 液 定 容 至 刻 度,混 勻,配 制 成 濃 度 分 別 為0.500μg/mL、1.00μg/mL、2.00μg/mL、5.00μg/mL、10.0μg/mL的標準系列工作液。臨用前配製。
3.5 材料有機微孔濾膜:0.22μm。
4 儀器和設備
4.1 高效液相色譜儀:配有二極體陣列檢測器或紫外檢測器。
4.2 分析天平:感量為0.0001g和0.01g。
4.3 渦旋混合器。
4.4 高速離心機:轉速≥10000r/min。
4.5 可控溫設備:可設定溫度20 ℃~30 ℃。
5 分析步驟
5.1 試樣製備
稱取具代表性小麥粉樣品200g,混合均勻,貯存於棕色廣口瓶中,備用。
5.2 試樣處理稱取2.50g試樣,置於50mL具塞離心管中,加入1g無水硫酸鎂,混合均勻,準確加入25.0mLN,N-二甲基甲醯胺,在渦旋振盪器上充分混合,振盪提取20min,靜置,10000r/min離心5min,取上清液待衍生。
5.3 衍生
5.3.1 試樣溶液的衍生化吸取1.00mL濾液,置於10mL具塞離心管中,加入100μL 三苯基膦衍生溶液,於渦旋混合器上充分混合,20 ℃~30 ℃環境溫度下,避光靜置衍生12h以上(若環境溫度達不到要求,可在20 ℃~30 ℃可控溫設備中進行衍生反應)。衍生液過0.22μm 有機微孔濾膜後,供液相色譜儀測定(待測液在20 ℃~30 ℃環境溫度下60h之內測定)。
5.3.2 標準溶液的衍生化吸取1.00mL不同濃度的標準系列工作溶液,按5.3.1操作步驟,與試樣溶液同步進行衍生,製備標準溶液工作曲線。
5.4 液相色譜參考條件
(a) 色譜柱:C18色譜柱(4.6mm×250mm,5μm)或性能相當者;
(b) 流動相:A 為水,B為甲醇,梯度洗脫程式見表1;
(c) 流速:1.0mL/min;
(d) 柱溫:30 ℃;GB5009.283—20213
(e) 檢測波長:230nm;
(f) 進樣量:10μL。
表 1
5.5 標準曲線的製作
將衍生後的標準系列工作溶液分別注入高效液相色譜儀中,測定相應衍生物的峰面積,以標準系列
工作溶液中偶氮甲醯胺的濃度為橫坐標,以衍生物的峰面積的回響值為縱坐標,繪製標準曲線。偶氮甲
醯胺標準溶液衍生物色譜圖參見附錄 A 中圖 A.
1。
5.
6 試樣溶液的測定
將試樣衍生液注入高效液相色譜儀中,得到偶氮甲醯胺衍生物的色譜峰面積,根據標準曲線得到試
樣溶液中偶氮甲醯胺的濃度。偶氮甲醯胺濃度應在標準曲線線性範圍之內,超出線性範圍則應使用
N,N-二甲基甲醯胺溶液稀釋試樣提取溶液,將空白基質提取溶液同步稀釋後配製標準曲線,同步衍
生,再進行分析。
6 分析結果的表述
試樣中偶氮甲醯胺的含量按式(1)計算。
X =c×V ×1000
m ×1000
……………………(1)
式中:
X ———試樣中偶氮甲醯胺的含量,單位為毫克每千克(mg/kg);
c
———由標準曲線得出的樣液中偶氮甲醯胺的濃度,單位為微克每毫升(μg/mL);
V
———試樣提取溶液體積,單位為毫升(mL);
m
———試樣質量,單位為克(g);
1000———單位換算係數。
計算結果保留兩位有效數字。
7 精密度
在重複條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不得超過算術平均值的10%。
8 其他
當取樣量為 2.50g 時,提 取 溶 液 體 積 為 25.0 mL 時,本 方 法 檢 出 限 為 2.0 mg/kg,定 量 限 為5.0mg/kg。
